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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
小鼠杂交瘤细胞;BmIFV-4E12
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
49
- 生长状态:
半贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
小鼠杂交瘤细胞;BmIFV-4E12
- 规格:
详见说明书
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
订购信息:
| 产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞;BmIFV-4E12 |
| 生长特性 | 半贴壁生长 |
| 货号 | XG-X17614 |
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
4-Benzoyloxy-2-azetidinone 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮杂环丁酮 分子式:C10H9NO3 度:98.0% 小鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane 中文名:2,2-双(3-氨基-4-羟苯基)六氟丙烷 分子式:C15H12F6N2O2 度:98.0% 小鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 度:98.0% 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-苄酯 分子式:C16H21NO6 度:98.0% 猪低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Biphenylcarboxylic acid 中文名:4-苯基苯甲酸 分子式:C13H10O2 度:98.0% 猪-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
山羊白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 3-Benzoylthiazolidine-2-thione 70326-37-3 中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮 分子式:C10H9NOS2 度:98.0%
山羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 3-Benzoylthiazolidine-2-thione 70326-37-3 中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮 分子式:C10H9NOS2
山羊白介素10elisa试剂盒 山羊白介素10试剂盒 规格型号:96T/48T 山羊白介素10试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:山羊白介素10试剂盒、山羊白介素10 elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 中文名: 分子式:C12H12F2O4
山羊白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 3-Benzalphthalide 中文名:3-亚苄基苯酞 分子式:C15H10O2 度:98.0%
山羊白介素10(IL-10)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-Benzoylthiazolidine-2-thione 中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮 分子式:C10H9NOS2
小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒 Gefitinib 中文名:吉非替尼 分子式:C22H24ClFN4O3
小鼠葡萄糖60酸脱氢酶 英文名称: Mouse Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 规格: 48T/96T 英文缩写: G6PD Cleroindicin E 中文名: 分子式:C8H14O3
小鼠破骨细胞分化因子elisa试剂盒 小鼠破骨细胞分化因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠破骨细胞分化因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠破骨细胞分化因子试剂盒、小鼠破骨细胞分化因子elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Ginsenoyne K 141947-42-4 中文名: 分子式:C17H24O3
小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒 Gefitinib 184475-35-2 中文名:吉非替尼 分子式:C22H24ClFN4O3 度:98.0% 关键词:
小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISAKit Gatifloxacin Mesylate 中文名:甲磺酸加替沙星 分子式:C20H26FN3O7S 度:98.0%
小鼠杂交瘤细胞;BmIFV-4E12紫背金牛酸 HPLC≥98% 5mg 蛋白样品多粘菌素层析法去内试剂盒20
紫丹参萜醚 HPLC≥98% 5mg RatMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone,MIS/AMHELISA试剂盒大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫铆因 HPLC≥98% 5mg 小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 ,英文名: cTn-Ⅰ ELISA Kit
紫杉素 B HPLC≥98% 5mg 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA检测试剂盒MouseBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 96T/48T
左旋哈氏豆属酸 HPLC≥98% 5mg 人花生四烯酸15脂加氧酶(ALOX15/LOG15)试剂盒 Human ALOX15/LOG15 ELISA kit
左旋马尾松树脂醇 HPLC≥98% 5mg RatC-ReactiveProtein,CRPELISAKit大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
()N甲基石榴碱 HPLC≥98% 5mg 20%中性Formalin固着液50毫升
()vibo环己五醇 HPLC≥98% 5mg MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISA试剂盒小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
()白花前胡甲素 HPLC≥98% 5mg 小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 试剂盒
()白花前胡乙素 HPLC≥98% 5mg Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验HMcAb 制备常取SCID 小鼠参照鼠-鼠细胞杂交技术制备,也可把杂交瘤细胞接种在经60 Co 轻度照射的裸鼠体内。将杂交瘤细胞与人皮肤纤维母细胞等量混合后接种,可避免裸鼠体内的病毒对杂交瘤细胞的侵扰。 鉴于不能像动物那样进行常规免疫以及人细胞体外培养条件的限制,融合的人-人杂交细胞不稳定,易丧失分泌Ig 的能力,并且 抗体 产量难以满足临床应用所需。人们对HMcAb 期望已逐渐转移到基因工程 抗体 的制备之中。
ml链霉素和10%FCS。3、杂交瘤细胞系DA11、DG3、DG9杂交瘤细胞均由本实验室建立,经SP2/0与免疫小鼠脾细胞融合筛选而成,抗体亚类均为IgG1,能稳定分泌抗人DAF单克隆抗体。4、平卧式常规法培养将DA11、DG3、DG9杂交瘤细胞用常规细胞培养法培养在25ml的方瓶中加培养液5ml,置37°C孵箱3~4d后,当瓶中只剩下少于5%有活力的细胞时离心收集上清,-20°C保存备用。5、直立式培养将DA11、DG3、DG9杂交瘤细胞常规培养在平卧式细胞培养瓶中直到细胞密度达90%~95%时
2. 操作方法 ⑴ 准备好脾细胞。 ⑵ 在50 ml沉淀管中混合108脾细胞和107小鼠骨髓瘤细胞,并加入50 ml 2.5%FCS-1640液。 ⑶ 室温400 g离心3 min,使细胞沉淀。 ⑷ 移去上清液。 ⑸ 轻敲管底部,使沉淀流动,把沉淀管放于40 ℃水浴中,使其达融合温度。 ⑹ 加预热至40 ℃的50%PEG
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