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文献和实验分子在纯化时若无商品化的亲和填料可供选择,也可以利用预活化填料,按照说明书介绍的流程,自行偶联生物分子到填料上,形成独有的亲和填料,来分离纯化其对应的生物分子,如酶/底物、抗原/抗体等。如需要纯化某种单抗,可以将相应的抗原偶联到预活化填料NHS activated Sepharose 4FF或CNBr activated Sepharose 4FF上,然后通过亲和层析实验,就可以实现抗体的高纯度纯化。偶联配基时,需要考虑活化基团是否与填料匹配,以及填料本身是否带有间隔臂。如果偶联的配基是蛋白
1 Sepharose HP也很适合纯化IgG。宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。 纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG,再进一步获取IgG抗原。 HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM,结合量达5mg IgM。HiTrap IgY是专门用来从蛋清里纯化IgY,结合量达100 mg纯IgY。 纯化重组蛋白 重组蛋白在设计、构建时应已融化入纯化构想。样品多夹杂
也很适合纯化IgG。宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。 纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG,再进一步获取IgG抗原。 HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM,结合量达5mg IgM。HiTrap IgY是专门用来从蛋清里纯化IgY,结合量达100 mg纯IgY。 纯化重组蛋白 重组蛋白在设计、构建时应已融化入纯化构想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解
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