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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
58
- 英文名:
PKI-587
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:PKI-587规格
英文名称:PKI-587
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
PKI-587(PF-05212384)isahighlypotentdualPI3K/mTORkinaseinhibitorwithIC50of0.4nM,5.4nMand1.6nMforPI3Kα,PI3KγandmTOR,respectively.
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号1197160-78-3
别名Gedatolisib;PF-05212384
纯度99.11%
分子式C₃₂H₄₁N₉O₄
分子量615.73
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
PKI-587规格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
MagNA Pure LC RNA Isolation Kit III (Tissue) 规格:>98%,BR度:>95%
MagNA Pure LC RNA Isolation Tissue Lysis Buffer - Refill 规格:BR度:>95%
LightCycler 480 RNA Master Hydrolysis probes 规格:>99.5%,分子生物学级度:>95%
LightCycler 480 Probes Master, 1x 50 ml 规格:AR度:>95%
LightCycler® 1536 DNA Probes Master(RealTime ready DNA Probes Master) 规格:>98%,BR度:>95%
LightCycler FastStart DNA MasterPLUS HybProbe, 96 reactions 规格:>99%,分子生物学级度:>95%
LightCycler FastStart DNA MasterPLUS HybProbe, 480 reactions 规格:分子生物学级,PCR Grade度:>95%
LightCycler FastStart DNA MasterPLUS HybProbe, 100 µl Reactions 规格:>99%,分子生物学级度:>95%
PKI-587规格97%500gMIP-2αStachydrine hydrochlorideAnti-Osterix 成骨相关转录子抗体Anti-Osterix 成骨相关转录子抗体48T/96T
加约20%水湿润,本品干重约为5g97%5gMIP-3α;CCL20Topotecan hydrochlorideAnti-Os05g0477200 protein 水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体Anti-Os05g0477200 protein 水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体48T/96T
99%250gMIFBerbamine HydrochlorideAnti-oxytocin receptor 催产素受体(缩素受体)抗体Anti-oxytocin receptor 催产素受体(缩素受体)抗体48T/96T
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:PKI-587规格
英文名称:PKI-587
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
PKI-587(PF-05212384)isahighlypotentdualPI3K/mTORkinaseinhibitorwithIC50of0.4nM,5.4nMand1.6nMforPI3Kα,PI3KγandmTOR,respectively.
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号1197160-78-3
别名Gedatolisib;PF-05212384
纯度99.11%
分子式C₃₂H₄₁N₉O₄
分子量615.73
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
PKI-587规格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
MagNA Pure LC RNA Isolation Kit III (Tissue) 规格:>98%,BR度:>95%
MagNA Pure LC RNA Isolation Tissue Lysis Buffer - Refill 规格:BR度:>95%
LightCycler 480 RNA Master Hydrolysis probes 规格:>99.5%,分子生物学级度:>95%
LightCycler 480 Probes Master, 1x 50 ml 规格:AR度:>95%
LightCycler® 1536 DNA Probes Master(RealTime ready DNA Probes Master) 规格:>98%,BR度:>95%
LightCycler FastStart DNA MasterPLUS HybProbe, 96 reactions 规格:>99%,分子生物学级度:>95%
LightCycler FastStart DNA MasterPLUS HybProbe, 480 reactions 规格:分子生物学级,PCR Grade度:>95%
LightCycler FastStart DNA MasterPLUS HybProbe, 100 µl Reactions 规格:>99%,分子生物学级度:>95%
PKI-587规格97%500gMIP-2αStachydrine hydrochlorideAnti-Osterix 成骨相关转录子抗体Anti-Osterix 成骨相关转录子抗体48T/96T
加约20%水湿润,本品干重约为5g97%5gMIP-3α;CCL20Topotecan hydrochlorideAnti-Os05g0477200 protein 水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体Anti-Os05g0477200 protein 水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体48T/96T
99%250gMIFBerbamine HydrochlorideAnti-oxytocin receptor 催产素受体(缩素受体)抗体Anti-oxytocin receptor 催产素受体(缩素受体)抗体48T/96T
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
水溶液。 ( 4 ) 载玻片:玻片浸润于 80% ( V/V ) 三氧化铬的硫酸溶液中至少 3 h,蒸馏水洗涤,风干,用前用 96% 的乙醇擦拭(见注 3) 。 ( 5 ) 玻璃盖玻片:18 mm x 18 mm 规格,No. 1 (见注4 ) ( 6 ) 解剖针及镊子( 如 5 号)。 ( 7 ) 干冰或液氮。 2.3 探针标记 ( 1 ) 标记试剂盒:基于随机引物法或者缺口前移法(如 Invitrogen 和 Roche 公司产品)。 ( 2 ) 标记好的核苷酸(如果试剂盒中未
3.4血压测量: 血压测量是诊断高血压及评估其严重程度的主要手段,目前主要用以下三种方法: 3.4.1诊所血压 诊所血压是目前临床诊断高血压和分级的标准方法,由医护人员在标准条件下按统一的规范进 行测量。具体要求如下: ⑴选择符合计量标准的水银柱血压计或者经国际标准(BHS和AAMI)检验合格的电子血压计进行测量。 ⑵使用大小合适的袖带,袖带气囊至少应包裹80%上臂。大多数人的臂围25-35cm,应使用长35cm、宽12-13cm规格气囊的袖带;肥胖者或臂围大者应使用大规格
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