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低温冷藏
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详见说明书
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100
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上海谷研
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50T
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文献和实验对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时,有时会出现非特异性扩增,可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染,引物特异性如何,Mg2+浓度偏高等等,其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物,可以选择热启动酶重新实验,即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类:一类是化学法修饰的热启动酶,如 Ace Taq ,预变性 95℃5 - 10 min 即可
等等。你首先应该看看你选择的POD试剂盒是否满足你的需求(比如凋亡处在什么阶段)。 另外,看看试剂盒的说明书,例如,有的提示:“有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全,以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应,进而产生假阴性结果。”导致TUNEL测定得不到结果。 maggie116 我也做了这个实验,发现整个斑马鱼都是荧光氯 sdxqsjf 我觉得你的实验方法上没有问题,我也用过ROCHE的试剂盒
或存放不当:质粒提取试剂盒成分复杂且保存条件不同,有的试剂还容易出现浑浊。在使用之前需要检查试剂是否保存得当,如果出现浑浊,可参考试剂盒说明书,进行 37℃ 温浴至溶液澄清,再冷却至室温使用。 ⑦洗脱液体积不合适:洗脱液使用体积过大会导致提取浓度偏低,过小会导致洗脱不充分,产量过低。建议参考试剂盒说明书来确定洗脱体积,如果洗脱浓度偏低,可以重复洗脱一次; ⑧洗脱液未添加到硅胶膜中心:可能会导致洗脱液覆盖不完全,导致洗脱效率降低。此外洗脱液可以使用碱性洗脱缓冲液或者无核酸酶的水,避免使用 PH<
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