- ￥599 - 2999
- 翌圣生物（Yeasen）
- 16726ES
- 上海翌圣
- 2026年03月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
问询
- 英文名：
RNA Rapid Isothermal Amplification Kit (Chromatographi)
- 保质期：
1年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-25~-15℃保存
- 规格：
16 T/48 T/100 T
| 规格： | 16 T | 产品价格： | ￥599.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 48 T | 产品价格： | ￥1619.0 |
| 规格： | 100 T | 产品价格： | ￥2999.0 |
本品是一款可用于重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）的原料，利用重组酶、单链DNA结合蛋白和链置换DNA聚合酶等开发出的一种适用于RNA核酸检测的恒温扩增原料，搭配客户设计的Nfo探针等，即可通过测流层析试纸条进行检测结果判读。
本品是在电泳型RPA原料的基础上，加入了核酸内切酶Ⅳ（endonuclease Ⅳ，即nfo，Cat#14543ES），客户只需设计nfo探针和生物素标记的反向引物，扩增过程中当nfo探针与模板链互补时，核酸外切酶Ⅳ识别并切割THF残基位点，获得既有探针标记物又有引物标记物的扩增子，只需加入对应的标记抗体，即可观察到试纸条检测线上的结果条带。
1、T4 Uvs X、T4 Uvs Y、GP32、Bsu DNA Polymerase、CK等多酶参与；
2、恒温37-42℃反应10~30 min，即可将少量核酸分子扩增到可检测水平；
3、检测灵敏度可达单个拷贝和数十个拷贝或更少的RNA；
4、对仪器依赖程度低，操作简便、结果判读简单；
5、广泛应用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。
1、引物设计
推荐引物设计长度在30-35bp之间，引物设计过程中应当尽量避免形成复杂的二级结构，下游引物5’端需要进行标记（所用的试纸条相匹配，例如生物素等），最终扩增产物的长度推荐在100-500bp之间。
2、 分子探针设计
分子探针长度约46-52个核苷酸，其中5’端距离THF位置约30-35 bp，3’端距离THF位置约15 bp。探针的5’端用一种抗原标记物标记，通常为FAM基团或羧基荧光素；内部含有碱基核苷酸类似物替换核苷酸（例如四氢呋喃残基THF）； 3’末端有聚合酶延伸阻断基团（例如C3-spacer，磷酸基或双脱氧核苷酸）。
注意：THF标记是取代序列中的碱基，并非额外插入THF标记；在开始实验前检查探针5’端标记的基团与下游引物5’端标记的基团是否与所用的试纸条相匹配。
-25~-15℃保存，有效期1年；试剂请提前分装。
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文献和实验流程和实验结果如下，给做RT-PCR 的战友一点参考。 首先引物设计 引物设计有3 条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应(即错配)。 具体实现这3 条基本原则需要考虑到诸多因素，如引物长度（primer length），产物长度 （product length），序列Tm 值
The ribonuclease protection assay (RPA)
, 5X transcription buffer, and RPA template set to RT. For each probe synthesis, add the following in order to a 1.5 ml Eppendorf tube: 1 µl RNasin® 1 µl GACU pool 2 µl DTT 4 µl 5X transcription buffer 1 µl RPA Template Set 10 µl [a-32
在于能监控qPCR 反应的质量。你能够了解反应过程中发生的所有扩增，是否存在残留污染，是否有引物二聚体等等，这是探针型分析无法给予的。 顺便提一下，大家通常认为探针法更加特异，而SYBR Green更为经济，适合筛查多个目标。然而，专家却有不同的看法。Qiagen全球高级产品经理Annette Tietze认为：“SYBR Green检测是一种经济高效的方法，主要用于未知目标的筛查。而在科学家寻找一个有趣的目标时，他们倾向于转到探针型PCR，因为他们认为这更加特异。在Qiagen，我们比较
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