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文献和实验扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料,用以校正仪器系统以外的物理误差,比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的,当用此类试剂的时候,应该将 ROX 参比
Step 2 · 根据线性化载体两端的序列,设计目标片段的引物——划重点!这对引物外侧要有 15-40 碱基与载体两端分别同源,内侧要有 15-20 个碱基与目标片段同源。如果想要设计启动子 SD 序列跟 ATG 的距离,这就是好机会。合成引物不要超过 65 个碱基为好。 · Step 3 · 以这对引物PCR目标基因,就能得到两端与载体同源的目标片段。按比例混合片段和线性化载体,加入关键试剂——预混酶并在 50 度保温 15-60 分钟(因插入片段数量而略有不同,以操作手册为准)——以赛默飞
演讲内容: 细胞培养耗材表面的选择 主讲人: 周智优——赛默飞NUNC & nalgene 细胞培养产品支持 主讲人简介: 毕业于暨南大学遗传学专业,获得理学硕士学位。期间主要研究内容为sFGFR2c胞外段对肺纤维化的抑制作用,研究成果发表在Molecular medicine。2011年7月加入赛默飞公司, 担任细胞培养耗材产品支持至今。 PPT简介: 1. 细胞培养流程介绍; 2. 细胞培养4要素
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