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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
储存条件：-20℃，干燥、避光、密封
- 保质期：
2年
- 英文名：
8-bromo-2-tosyl-2,3-dihydroisoquinolin-4(1H)-one
- 库存：
1000
- 供应商：
四川省维克奇生物科技有限公司
- CAS号：
864738-30-7
- 规格：
500mg
英文名称：8-bromo-2-tosyl-2,3-dihydroisoquinolin-4(1H)-one
CAS号：864738-30-7
纯度 ：待定
储存条件：-20℃，干燥、避光、密封
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
editing. Nat Biotechnol 30(5):460–465. doi: 10.1038/ nbt.2170 12. Deveau H, Garneau JE, Moineau S (2010) CRISPR/Cas system and its role in phagebacteriainteractions. Annu Rev Microbiol64:475–493. doi: 10.1146/annurev. micro.112408.134123 13
设计了 sgRNA 之后怎么办呢？还是这篇文章先讲一下这里的框架首先是实验设计Experimental design1. Target selection for sgRNA--选择靶点详情见：CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计 https://www.jianshu.com/p/ 8222f449cb442. Approaches for sgRNA construction and delivery.sgRNA 的合成和投递有两种方式：A）PCR；B）单独的 sgRNA
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