4-(异烟酰胺基)邻苯二甲酸 CAS 1245212-48-

CRISPR基因敲入为什么比敲除难

同一个靶点，做敲除两周就能看到明显的 indel，做敲入两个月可能还拿不到一个正确的克隆。这不是操作水平的问题，而是两条技术路径依赖的细胞机制完全不同。 先说结论：敲除依赖 NHEJ，它在整个细胞周期都活跃、不需要模板、速度快，所以效率天然高；敲入依赖 HDR（或同源非依赖的其他路径），HDR 只在 S/G2 期活跃、需要外源供体模板进入细胞核并与断裂末端同源重组，效率通常只有百分之几甚至更低。此外，敲入还要面对"编辑后的等位基因被 Cas9 再次切割"和"随机整合的供体模板产生假阳性"两个

CRISPR编辑原代细胞难点有哪些

验证、并严格规划细胞用量和实验窗口。 --- 一、三个绕不开的生物学限制 限制一：递送效率与细胞活力难以两全 原代细胞普遍对脂质体转染不敏感，而且很多原代细胞（尤其是免疫细胞、造血细胞）本身就是悬浮状态，脂质体几乎无效。 慢病毒感染的问题在于：原代细胞的病毒感染效率个体差异大、且需要较长的表达和筛选时间。原代细胞在体外维持的时间有限，往往等不起。 目前的主流方案是 RNP 电转： 不依赖内吞和细胞分裂，对悬浮原代细胞有效； 起效快，48–72 h 就能检测编辑效率； 不整合，不引入外源 DNA

气相色谱法测定聚酰胺树脂中己内酰胺残留量

。参考有关文献［2～6］，我们采用气相色谱法测定聚酰胺树脂中残留ε-己内酰胺单体的含量，以此为聚酰胺处理效果的评价指标之一。 　　1  仪器与试药 　　日本岛津-14B气相色谱仪，氢火焰离子化检测器；柱：SE-54，OV-1701，FFAP大口径石英毛细管柱(30 m×0.53 mm，1 μm，自制)，高纯氮气(99.99%)，氢气(99.99%)，丙酮、乙醇、水杨酸甲酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯均为分析纯，ε-己内酰胺(美国ACROS，含量>99%，CAS：105-60