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- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0210 | DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow) | DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0210L | DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow) | DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment | 1,000 units |
| M0210M | DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow)(高浓度) | DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment(High Concentration) | 1,000 units |
| M0210S | DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow) | DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment | 200 units |
| M0210V | DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow) | DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment | 100 units |
产品特点
DNA Polymerase I, Large (Klenow) fragment was originally derived as a proteolytic product of E.coli DNA polymerase that retains polymerase and 3’ —> 5’ exonuclease activity
- Removal of 3’ overhangs or fill-in of 5’ overhangs to form blunt ends
- Lacks 5’ —> 3’ exonuclease activity
- Generates probes using random primers
- Second strand cDNA synthesis
DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow)是大肠杆菌(E. coli)DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物,其保留了聚合和 3´→5´核酸外切酶活性,但缺失 5´→3´ 核酸外切酶活性(1)。Klenow 保留了全酶的聚合保真度,且不会降解 5´ 末端。
重点
产品来源
大肠杆菌(E. coli)菌株,包含已去除 5´→3´ 核酸外切酶结构域的大肠杆菌(E. coli)polA 基因。- 产品类别:
- DNA 操作产品
- 应用:
- Blunting,
- DNA Sequencing,
- Polymerases for DNA Manipulation,
- RT-PCR & cDNA Synthesis, PCR
备注:以上仅为 M0210 的部分产品信息,如需NEB货号 M0210 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合酶
I Klenow片段)或AmpliTaq(全长的Taq DNA聚合酶)等聚合酶差;在扩增5.0-7.0kb片段时亦不比各种形式的Taq DNA聚合酶(如Ampli Taq、Klentaq 1、Klentaq 5等N-末端缺失的变异株)有明显优越之处。因而以往的PCR反应产物限制在5.0kb以内。超出这一范围,PCR扩增反应效率将明显下降,同时产物会降解。即使将延伸时间定为30分钟(10倍于通常所需)亦无改进。 利用两种DNA聚合酶进行较大片段DNA的扩增 美国华盛顿大学医学院的Barnes WM
扩增较大片段DNA 的PCR 方法 一般PCR 方法在扩增大片段DNA 时的局限性: 通常所用的PCR 方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA 聚合酶,具有完整的3'外切酶校读活性(3'-editing-exonuclease),可以将每个循环中碱基的错配率由10-4 降到10-3 ,从而提高PCR 产物的准确性。但它在扩增1.5-2.0kb片段时,效率
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