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- NEB
- M3003
- 2026年04月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M3003 | Luna®通用 qPCR 预混液 | Luna®Universal qPCR Master Mix |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M3003E | Luna® 通用 qPCR 预混液 | Luna® Universal qPCR Master Mix | 2,500 rxns |
| M3003L | Luna® 通用 qPCR 预混液 | Luna® Universal qPCR Master Mix | 500 rxns |
| M3003S | Luna® 通用 qPCR 预混液 | Luna® Universal qPCR Master Mix | 200 rxns |
| M3003V | Luna® 通用 qPCR 预混液 | Luna® Universal qPCR Master Mix | 100 rxns |
| M3003X | Luna® 通用 qPCR 预混液 | Luna® Universal qPCR Master Mix | 1,000 rxns |
产品特点
使用染料法 qPCR，快速、灵敏、精确地对靶标 DNA 和 cDNA 序列进行检测和定量。
选择更简单
- 一种应用对应一种产品，简化选择
- 方便的预混液剂型及易操作的实验步骤使反应体系的建立更便捷
- 无干扰、可视化示踪染料，避免加样失误
产品性能优异
- Luna® 系列所有产品均经过严格测试，以优化产品的特异性、灵敏度、精确性和可重复性
- 该产品对于不同来源的样品均具有稳定的性能
- 通过与市面上其它 qPCR 和 RT-qPCR 试剂的综合评测，Luna 产品展现了卓越的性能
染料法定量 PCR（qPCR）通过双链 DNA（dsDNA）结合染料（常用的染料为 SYBR® Green I）的荧光，来实时测量每个 PCR 循环过程中的 DNA 扩增。通过荧光信号显著超过背景荧光所经历的循环数，可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品之间的靶基因相对丰度，或者参考通过已知浓度样品绘制的标准曲线，对未知样品绝对定量。
Luna 通用 qPCR 预混液是经优化的 2X 反应预混液，可以用于对靶标 DNA 序列进行实时 qPCR 检测和定量，适用于使用大多数实时荧光定量 qPCR 仪器的 SYBR®/FAM 通道。该预混液包含热启动 Taq DNA 聚合酶，还添加了独特的惰性参比染料，该染料可与多种 qPCR 仪器兼容（包括需要高 ROX 或低 ROX 参比信号的仪器）。独具特色的是：预混液还包含可防止交叉污染的 dUTP，以及有助于观察反应体系建立的非荧光可见示踪染料。该染料的光谱与 qPCR 荧光染料不重叠，因此不会影响到实时检测数值。
该预混液浓度为 2X，包含 DNA 扩增和定量所需的所有 PCR 组分（引物和 DNA 模板除外）。使用 Luna qPCR 配合已有的商品化的 qPCR 测定引物，可对基因组 DNA 或感兴趣的 cDNA 进行定量检测。
备注：以上仅为 M3003 的部分产品信息，如需NEB货号 M3003 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验成功做完了逆转录，这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多，即使使用了 qPCR 预混液，也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列（Q411 /Q421 /Q431 /Q441）提供不同颜色的试剂，利用移液过程中的变色效应，追踪移液过程，可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时，引物设计需遵循以下原则：引物长度 18～25bp，产物长度 80～300bp，GC 含量 40～60
真香！用 qPCR 做外泌体研究，南京医科大学拿下 41 分 SCI
等）、miRNA 加尾法逆转录试剂盒做反转录：适用于短片段 RNA（主要为 miRNA）的加尾法。 4）qPCR 检测 采用 Umibio 2×SYBR Green qPCR 试剂：预混 ROX1 型适用于 ABI 5700 等设备、预混 ROX2 型适用于 ABI 7500 等设备。 5）数据分析：采用仪器自带的 QPCR 分析软件进行数据分析 可以看到 qPCR 检测外泌体可行且可靠，但实验过程并不简单，因此我们对经常会遇到的问题及解答也进行了整理，帮助大家更好的完成实验。 qPCR检测外泌常见问题及解决
份，单独分析和比较，以检验裂解。利用CelluLyser，我们发现各等份之间的一致性很好，说明细胞均匀地裂解。利用加热或蒸馏水来裂解细胞通常产生异质的裂解液，导致各等份不均一。通过RNA加标可检测回收效率和重复性。我们设计了一个带有5’帽子和A尾巴的通用加标，以模拟天然的mRNA。RNA加标可添加到裂解液中，或显微注射到细胞中。逆转录也应当优化。因引物结合、目的基因和逆转录酶的不同，RT产量可相差200倍之多。此外，添加到RT预混液中的裂解液的量也必须仔细调整，以避免抑制，同时让RT产量最高。预扩
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