Luna® Cell Ready 一步法 RT-qPCR 试

品牌	货号	产品中文名称	产品英文名称
NEB	E3030	Luna®Cell Ready 一步法 RT-qPCR 试剂盒	Luna®Cell Ready One-Step RT-qPCR Kit

货号	产品中文名称	产品英文名称	规格
E3030S	Luna® Cell Ready 一步法 RT-qPCR 试剂盒	Luna® Cell Ready One-Step RT-qPCR Kit	100 rxns

产品特点

无需纯化，直接从细胞到 RNA 定量 

• 试剂盒包含 100 次裂解反应和 500 次染料一步法 RT-qPCR 反应
• 有效裂解多种细胞系的 10 至 10 万个细胞
• 仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除
• 联合使用 LunaWarmStart^® RT 和 Hot Start Taq，提高了热稳定性，且可在室温下建立反应体系
• 可单独购买裂解模块：Luna Cell Ready 裂解模块（NEB #E3032）

Luna^® Cell Ready 一步法 RT-qPCR 试剂盒为直接染料法 RNA 检测和定量提供了所有必要的组分，且无需进行 RNA 提取和纯化。Luna Cell Ready 一步法 RT-qPCR 试剂盒包括：1）Luna Cell Ready 裂解模块（NEB＃E3032S）和 2）Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒（NEB＃E3005L）。
细胞培养常用于替代活体生物来分析基因表达或对治疗的反应。传统上使用柱提法或化学试剂法从处理过的细胞中提取和纯化 RNA。Luna Cell Ready 裂解模块整合了 DNase I 和 Luna Cell Ready 蛋白酶的功能，仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除。裂解模块包含独特的 Luna Cell Ready RNA 保护试剂，可在细胞裂解过程中保持 RNA 完整性。50 µl 裂解体系下可对 10 – 100,000 个细胞进行裂解反应。2 µl 裂解物（相当于 0.2 – 4,000 个细胞的 RNA）即可实现 20 µl 体系的 RT-qPCR 反应。与其它 Luna 产品一样，裂解缓冲液包含惰性蓝色示踪染料，使整个加样流程可视化。

Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒兼容大多数实时荧光定量仪器的 SYBR^®/FAM 荧光通道，可对靶标 RNA 序列执行染料法实时定量分析。在该试剂盒中，联合使用热启动 Taq DNA 聚合酶与新型 Luna WarmStart 反转录酶，通过适配体可逆抑制来双重控制酶活性。Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒可以直接将 Luna Cell Ready 裂解模块制备的细胞裂解物中的 RNA 转录本进行检测和定量。

下表列出的细胞系可使用 Luna Cell Ready 裂解模块裂解。这些细胞进行 5 个 10 倍梯度稀释（在 50 µl 体系中裂解 10 – 100,000 个细胞），并取 1 µl 裂解物在 20 µl 体系中进行一步法 RT-qPCR 反应。每个细胞系的线性结果显示在最后一列。此外，经测试一些昆虫细胞系也能使用上述裂解液裂解。
表 1：经验证过的细胞系

细胞系	性质	属	50 μl 体系可裂解的细胞数
A549	粘着型	智人、肺、癌	10 - 100,000
HEK293	粘着型	智人、肾	10 - 100,000
HeLa	粘着型	智人、子宫颈、腺癌	10 - 100,000
HepG2	粘着型	智人、肝脏、癌	10 – 1,000
NCI-H460	粘着型	智人、肺、癌	10 - 100,000
SK-N-SH	粘着型	智人、大脑、成神经细胞瘤	10 – 10,000
U2Os	粘着型	智人、骨骼、骨肉瘤	10 - 100,000
Jurkat	悬垂型	智人、T 淋巴细胞、白血病	10 - 100,000
K-562	悬垂型	智人、成淋巴细胞、白血病	10 - 100,000

备注：以上仅为 E3030 的部分产品信息，如需NEB货号 E3030 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。