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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0470 | Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶(高浓度) | Hi-T7®RNA Polymerase (High Concentration) |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0470T | Hi-T7 RNA 聚合酶(高浓度) | Hi-T7 RNA Polymerase (High Concentration)(High Concentration) | 50,000 units |
产品特点
Hi-T7 RNA 聚合酶适合在较高温度下进行体外转录。
- 在 37 - 56℃ 范围内有活性,最佳温育温度为 50 - 52℃。
- 使用 T7 噬菌体启动子进行体外转录
- 高浓度版本的 Hi-T7 RNA 聚合酶(NEB#M0658)
- 提高使用帽类似物共转录时的加帽效率
- 高温合成减少 dsRNA 副产物的形成,从而降低 RNA 的免疫原性
- 适用于有经验的体外转录用户
- 随附 Hi-T7 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁
Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶(高浓度)的浓度为标准 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶(NEB#M0658)的 20 倍,是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。该酶配有 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁溶液,可进一步调试不同条件,例如核苷酸浓度。
体外转录除了 RNA 聚合酶外还涉及多种成分,包括核糖核苷酸、无机焦磷酸酶和 RNase 抑制剂,这些均可单独购买。详细信息请参考“相关产品”部分
Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶是一种经基因工程改造的 DNA 依赖性 RNA 聚合酶,对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性,跟野生型噬菌体 T7 RNA 聚合酶相比,它可在更高的温度下进行反应。Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶的最佳温度为 50-52°C。
产品来源
An E.coli strain that carries an engineered His-tag T7 RNA Polymerase gene.- 产品类别:
- RNA 合成体外转录(IVT),
- Nucleotide Solutions for RNA
- 应用:
- Transcription-Mediated and NASBA Amplification
备注:以上仅为 M0470 的部分产品信息,如需NEB货号 M0470 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板( template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关,所以也称转录酶。反应以下式示: n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成,合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由( 1) DNA与酶的结合
,则可计算其直径约为100A,即约为双链DNA的30bp节段的长度。然而全酶可结合约60个核苷酸 ,提示其形状应为椭圆球形。 结构 为什么细菌 的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多,仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明,噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子;它们不能识别其他启动子。例如噬菌体T3和T7的RNA聚合酶分子很相似
来提高灵敏度。 小分子RNA探针的制备 方法其实很简单:只需要准备目的基因的一小段寡核苷酸序列,3'端另外增加8个和T7启动子互补的碱基,将这段寡核苷酸和T7启动子引物退火,用Klenow大片断补齐得到双链的转录模版,然后用T7RNA聚合酶、rNTP和标记物混合,体外转录得到标记的小分子RNA探针。这种方法可以快速制备各种标记(同位素、非放射性标记均可)的小于100nt的小分子RNA探针,适用于包括RPAs,Northerns和原位杂交等各种方法检测小分子核仁RNA(small nuclear
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