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- 技术资料
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
ME-180
- 运输方式：
复苏
适用范围:
本产品仅限于科学研究，绝不可作为人类或者动物疾病的治疗产品使用。
细胞特性：
1） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
2） 含量：>1x10^6
3） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4） 来源：见说明
5） 形态：请直接向我司客服索取
1）运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：
1.干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；
2.存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
3.收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞接受后的处理：
1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3） 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的的完全培养基。
4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10E6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
ATCC是全球首屈的生物材料资源和标准组织，其使命主要集中在标准参考微生物，细胞系和其他材料的获取，鉴定，生产，保存，开发和分销。在保持传统收集材料的同时，ATCC开发出高质量的产品，标准和服务，以支持改善全球人口健康的科学研究和突破。
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