- ￥1265
- mlBio/酶联生物
- ml2889
- 国内
- 2026年02月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
89
- 英文名：
纤维素酶CL/羧甲基纤维素酶测试盒
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光，低温保存
- 规格：
100管/48样
纤维素酶CL/羧甲基纤维素酶测试盒
微量法
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
CL（EC 3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化羧甲基纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
测定原理：
采用蒽酮比色法测定CL催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存； 临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。
样品测定的准备：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
加样表和测定步骤：
| 试剂名称 | 对照管 | 测定管 |
| 样本 | 50 | 50 |
| 试剂一（μL ） | 90 | |
| 试剂二（μL ） | 370 | 370 |
| 蒸馏水（μL ） | 180 | 90 |
| 糖化液 (μL) | 140 | 140 |
| 试剂三 (μL) | 260 | 260 |
纤维素酶CL/羧甲基纤维素酶测试盒
CL活力计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x - 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
2、血清（浆）CL活力的计算
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总]÷V样÷T =39.8×(ΔA+0.0462)
3、细胞、细菌和组织中CL活力的计算
（1）按照蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min/mg prot)=[1000×(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总]÷(V样×Cpr) ÷T
=39.8×(ΔA+0.0462) ÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=39.8×(ΔA+0.0462) ÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min /104 cell)=[1000×(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总]÷(500×V样÷V样总) ÷T
=0.0796×(ΔA+0.0462)
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反总：反应体系总体积，0.6mL； V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，60 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
b.用96孔板测定的计算公式如下
1、标准条件测定回归方程为y = 2.5090x - 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
2、血清（浆）CL活力的计算
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0462) ÷2.509×V反总]÷V样÷T =79.6×(ΔA+0.0462)
3、细胞、细菌和组织中CL活力的计算
（1）按照蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min /mg prot)=[1000×(ΔA+0.0462)÷2.509×V反总]÷(V样×Cpr)÷T
=79.6×(ΔA+0.0462) ÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0462)÷2.509×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T
=79.6×(ΔA+0.0462)÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力(μg /min /104cell)=[1000×(ΔA+0.0462)÷2.509×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T
=0.1592×(ΔA+0.0462)
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反总：反应体系总体积，0.6mL； V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，60 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
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文献和实验一、目的 学习和掌握3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定纤维素酶活力的原理和方法，了解纤维素酶的作用特性。 二、原理 纤维素酶是一种多组分酶，包括C 1 酶、C X 酶和¦Â-葡萄糖苷酶三种主要组分。其中C1酶的作用是将天然纤维素水解成无定形纤维素，C X 酶的作用是将无定形纤维素继续水解成纤维寡糖，¦Â-葡萄糖苷酶的作用是将纤维寡
后不立即进行提取，则应冷冻保存，动物组织更要深低温保存。某些容易失活的物质，一般宜采用新鲜材料。 （二）细胞的粉碎 除了提取体液、组织间液内的多肽、蛋白质、酶不需粉碎细胞外，凡要提取组织内、细胞膜上及胞内的生物活性物质，都必须把组织和细胞粉碎，使活性物质充分释放到溶液内。不同的组织，细胞的破碎难易不一，因此所使用的粉碎方法也不完全相同。如脑、胰、肝等比较软嫩的组织，用普通匀浆器研磨就行，肌肉、心脏等则需绞碎后再作匀浆。现浆常用的细胞粉碎方法介绍如后。 1．物理
后不立即进行提取，则应冷冻保存，动物组织更要深低温保存。某些容易失活的物质，一般宜采用新鲜材料。 （二）细胞的粉碎 除了提取体液、组织间液内的多肽、蛋白质、酶不需粉碎细胞外，凡要提取组织内、细胞膜上及胞内的生物活性物质，都必须把组织和细胞粉碎，使活性物质充分释放到溶液内。不同的组织，细胞的破碎难易不一，因此所使用的粉碎方法也不完全相同。如脑、胰、肝等比较软嫩的组织，用普通匀浆器研磨就行，肌肉、心脏等则需绞碎后再作匀浆。现浆常用的细胞粉碎方法介绍如后。 1．物理
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