- ￥2500 - 8800
- 武汉
- tyrosinase (oculocutaneous albinism IA)原核表达，哺乳动物细胞表达
- 2026年05月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
重组蛋白表达
- 提供商：
福因德科技（武汉）有限公司
可以根据客户需求：选择不同的标签蛋白、抗性、表达元件和表达宿主。
原核表达特色：
- 蛋白可溶性表达;
- 活性蛋白表达;
- 用于蛋白质互作研究的蛋白表达;
- 蛋白质成功复性;
- 原核表达优势：
- 根据客户序列信息，Frdbio进行基因优化分析：mRNA、密码子偏爱性等多维度优化。2. 多种表达载体和宿主菌供选择。
| 服务内容 | 价格 | 周期 | 交付标准 | 备注 | |
| 基因优化合成 | 市场优惠时价 | 含合成基因质粒和克隆菌 | |||
| 蛋白表达 | *验证测试 | 500元 | 5个工作日 | 含目的基因的表达质粒+克隆菌株+表达菌株 | |
| *表达保证型 | 2000元 | 10个工作日 | 不成功不收费 | ||
| *上清保证型 | 4500元 | 15个工作日 | |||
| 蛋白纯化 | 1-3mg蛋白，纯度>85% | 根据蛋白难度协商定价 | 5个工作日 | ||
| 3-5mg蛋白，纯度>85% | 5个工作日 | ||||
| 5-10mg蛋白，纯度>85% | 10个工作日 | ||||
表达保证型：由Frdbio设计表达方案，表达目的蛋白的全长或者部分片段；
上清保证型：由Frdbio设计表达方案，表达目的蛋白的全长或者部分片段，并且保证其表达状态为上清可溶。
哺乳动物细胞蛋白表达
Frdbio配套的cDNA基因文库、自主知识产权的pFrd系列载体以及医药研发级别的工程细胞系，提高蛋白表达的成功率和产量。Frdbio可提供瞬转HEK293细胞和稳转CHO细胞系
| 服务名称 | 服务内容 | 周期 |
| 表达系统选择 | 自主知识产权的优化表达载体Frdbio系列，自主驯化高表达量293和CHO细胞 | |
| 表达载体构建 | 基因优化及合成，亚克隆到真核表达载体无内毒素质粒抽提。 | 2-4周 |
| 瞬转小试 | 细胞顺转，表达小试，表达分析鉴定 | 2-3周 |
| 表达纯化 | 表达条件优化、SDS-PAGE/WB分析鉴定、最优条件80ml扩大及纯化测试、标签去除测试（可选）。 | 2-4周 |
| 大规模发酵与纯化 | 无内毒素质粒大提、质粒质控及瞬时转染、蛋白亲和纯化（或其他纯化方式）、蛋白buffer置换浓缩、蛋白SDS-PAGE/WB 鉴定、MS鉴定（可选）。 |
*不同蛋白表达差异较大，我们尽可能在小试阶段尽可能多提供蛋白以满足您的蛋白需求。
*正我们使用标签（His,HA,cMyc）特异性抗体检测蛋白是否表达;
*如果选择不带标签表达，后期纯化费用会非常高,且需要提供蛋白特异性抗体用于检测蛋白。
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文献和实验子的载体，必须选择合适的宿主菌进行表达。因此，当你的蛋白没有表达出来时，可以考虑更换宿主菌。见下图 3.密码子的使用频率低。有些基因其本身含有许多稀有密码子，尤其是起始密码之后的15个碱基之内的稀有密码子，对蛋白表达有着很重要的影响。优化密码子对原核表达似乎效果很好，对真核表达系统未见得有很好的效果。曾经有某人在毕赤酵母表达某蛋白两年未果，试图将密码子优化进行表达，结果还是没有表达。一气之下将该优化的基因序列克隆到原核表达载体，表达量居然出奇地高！这是一个辛酸的笑话，但是一个真实的故事
下调不能说明活性降低，因为决定GSK3-beta的活性的还与其磷酸化的比例和磷酸化的位点有关。所以你除了要做GSK3-beta总的蛋白表达之外，还要做磷酸化的GSK3-beta的蛋白表达。 （2）应该活性形式和非活性形式都做。一般来讲，GSK3-beta在Ser9位点磷酸化之后活性收到抑制，而在216位点磷酸化之后，其活性收到加强。因此建议将GSK3-beta的两个磷酸化位点都做了，另外还要同时检测GSK3-beta的总蛋白表达，这样才能全面的说明问题。
先来看下传统重组蛋白表达系统： 传统重组蛋白表达系统应对的挑战： 操作流程长：5天-4周时间 很多蛋白不能在细胞内成功表达 不可以改造目标蛋白 以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统，具有表达量高和成本低的优点，但是蛋白质翻译后缺乏加工机制（比如形成二硫键和蛋白糖基化等），且很难保留生物活性。 以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统，具有表达量高，可诱导，糖基化机制接近真核生物等优点，但是部分蛋白产品易降解，表达量不可控。 哺乳动物细胞和昆虫
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