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- 2026年02月07日
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
DNA发生反应。然后用酶标羊(或兔)抗鼠IgG抗体及相应底物进行显色。使用这一方法,可检测出单个抗原分子。材料与试剂包括: ①所测物的单克隆抗体(鼠)；②所测物的多克隆抗体(兔)；③生物素化羊抗鼠IgG；④生物素化羊抗兔IgG；⑤生物素化dUTP；⑥Klenow聚合酶；⑦PCR反应液；⑧引物(自行设计)；⑨生物素化DNA标记分子。
直接IM―PCR (以rhIL-3的检测为例) 【试剂与配制】 TBS：20mmol/L Tris-HCl（pH7.4），150mmoI/L NaCL 封闭液：1.5％ BSA （用TBS配制） 抗hIL-3单抗 生物素化羊抗鼠IgG 亲合素 DNA指示分子(生物素―AdAT) PCR反应液：5×PCR缓冲液10μl，dNTP 4μl，引物4μl，EP-DNA聚合酶0.5μl,蒸馏水31.5μl 【操作方法】 (1) 用TBS稀释rhIL-3至6.0μg
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