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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京诺博莱德科技有限公司
- 保存条件:
已收到实际货物为准
产品简介:
DNA非变性加样缓冲液(2×)是一种非变性的DNA上样缓冲液。该试剂主要由Tris、EDTA、甘油等组成,不含溴酚蓝,加样后易下沉,使用时需稀释至1×使用。
产品组成:
| 编号 名称 |
N0803 | Storage |
| DNA非变性加样缓冲液(2×) | 5ml | 4℃ |
| 使用说明书 | 1份 | |
DNA非变性加样缓冲液(2×)
操作步骤(仅供参考):
1.DNA样品与DNA非变性加样缓冲液(2×)等量混合。
2.直接加到DNA胶内,电泳。
注意事项:
1.如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
DNA非变性加样缓冲液(2×)
有效期: 12个月有效。
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文献和实验一、原理及目的(略)二、试剂 1、30%丙烯酰胺贮存液:29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中,验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中,4℃保存。2、1.5mol/L Tris(pH8.8)溶液3、10% SDS溶液4、10%过硫酸铵:新鲜配制5、TEMED溶液:4℃保存6、1.0 mol/L Tris(pH6.8)溶液7、2×样品溶解液:2%SDS,5%巯基乙醇,10%甘油,0.02%溴酚蓝,0.01mol/L Tris-HCl(pH8.0)缓冲液。8、5×Tris
酸铵,0.008TEMED。TEMED应在灌胶前才加入。 5)分离胶聚合完全后,倒去正丁醇,用蒸馏水冲洗胶面数次,用滤纸吸干胶面上的残余水。 6)灌注积层胶,立即插入干净的梳子,避免产生气泡。 7)积层胶聚合完全后,小心拔出梳子,用移液器 吸取电极缓冲液清洗加样孔数次,以除去未聚合的丙烯酰胺。 8)在上下电泳槽 中加入足够的电泳缓冲液。 3、样品的制备 在蛋白溶液中加入等体积的2×样品溶解液,使蛋白的终浓度为3-4mg/ml,混合液在沸水浴中加热3分钟,冷却后即可上样。
,用0.01N的 NaOH和3M NaCl洗涤15min×2次; 6)用真空转移器把RNA从胶上转移至膜上,以0.01N的 NaOH和3M NaCl为转移缓冲液。 10cmHg,3 hr; (注:连好真空泵后应该实验一下,然后在放置凝胶,凝胶比较软,应该果断的把凝胶取出,并且反转一下,利于转膜,不能有气泡,应该用玻璃棒轻轻赶出,液面始终高于凝胶才有效,避免加样孔接触尼龙膜边缘,不利于抽真空,把凝胶取出后应该用含有溴乙啶的溶液浸泡,观察转膜效果)- 7)烘烤膜:120℃ 30分钟 (或将膜RNA
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