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上海笃玛生物科技有限公司
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土壤全钾含量试剂盒
测定意义
土壤钾包括矿物钾、缓效性钾及速效性钾,植物吸收土壤溶液钾离子水平主要决定于土壤速效钾含量,一般速效性钾含量除受耕作、施肥等影响外还受土壤缓放性钾贮量和转化速率控制。
测定原理
混合酸高温消解土壤样品,采用火焰光度计测定样品中的钾含量。
自备实验用品及仪器
消解仪、消化管、天平、烘箱、100目筛、移液管、浓硫酸、高氯酸、火焰光度计。
试剂组成和配制
标准品:液体20mL×1瓶,4℃保存。浓度为1mmol/L KCl。

生化试剂盒的通用测定步骤可分为 前期准备、试剂配制、参数设置、校准与质控、样本检测、结果计算 六大核心环节,具体细节如下:
一、前期准备
1. 试剂准备:检查试剂盒各组分(R1、R2、校准品、质控品等)是否齐全、无异常(如浑浊、沉淀、变色),按要求从储存环境取出,平衡至室温(通常 20~25℃,平衡时间 5~30 分钟,具体以试剂盒说明为准),轻轻摇匀备用。
2. 样本准备:确认待检测样本类型符合要求,已按规范完成采集与处理(如血清 / 血浆样本离心分离、组织匀浆制备、尿液离心去沉淀等);若样本需稀释或预处理(如去除干扰物),提前完成相关操作。
3. 仪器准备:确认使用的生化分析仪 / 酶标仪等仪器符合试剂盒适用要求,提前开机预热,进行仪器清洁(避免残留污染),准备好所需耗材(如反应杯、移液枪头)。
二、试剂配制(如适用)
1. 即用型试剂:无需额外配制,平衡至室温后直接使用。
2. 需混合试剂:按试剂盒规定比例(如 R1:R2=4:1、3:1 等)准确混合试剂组分,现配现用,避免提前配制导致试剂失效。
3. 校准品配制:用指定稀释液(如试剂盒配套稀释液、生理盐水)将校准品稀释至所需浓度梯度(通常 3~5 个梯度,如 0、20、40、80、160 nmol/L),稀释后充分摇匀备用。
三、仪器参数设置
根据试剂盒要求及所用仪器型号,设置核心检测参数:
1. 基础参数:检测方法(终点法、速率法、两点法等)、孵育温度(通常 37℃)、反应时间(含孵育时间和检测时间)。
2. 波长参数:主检测波长(如 450 nm、540 nm,根据反应产物特征吸收峰确定),若存在背景干扰,需设置副波长进行校正。
3. 液量参数:明确试剂与样本的比例(如 R1 200 μL + 样本 20 μL,孵育后加 R2 50 μL),确保移液体积准确。

四、校准与质量控制(保障结果准确性)
1. 校准程序:将配制好的各浓度梯度校准品依次加入反应杯,按设置的参数进行检测,记录各校准品的吸光度值 / 吸光度变化率;以校准品浓度为横坐标(X 轴)、对应吸光度相关值为纵坐标(Y 轴),采用指定拟合方式(如线性回归、Spline 拟合)绘制标准曲线,要求相关系数 R²≥0.990(具体以试剂盒性能指标为准)。
2. 质控程序:同步测定高、中、低三个水平的质控品,检测完成后查看质控结果是否在规定靶值范围内;若超出范围,需排查试剂、仪器、操作等环节问题,解决后重新进行校准与质控。
五、样本检测
1. 按仪器参数设定的试剂 / 样本比例,依次向反应杯加入对应试剂和待检测样本,确保加样顺序正确(如先加 R1 和样本,孵育后再加 R2)。
2. 按规定的孵育温度和时间完成反应,避免反应不充分或过度反应。
3. 反应结束后,仪器自动读取各样本的吸光度值 / 吸光度变化率,记录原始数据。
六、结果计算与记录
1. 依据绘制好的标准曲线,结合样本的吸光度相关值,自动或手动计算样本中被测物的浓度 / 活性(如公式:被测物浓度 =(样本吸光度值 - 空白吸光度值)× 校准品浓度 /(校准品吸光度值 - 空白吸光度值))。
2. 记录检测结果,同时标注校准曲线相关系数、质控结果等关键信息,便于后续结果追溯与验证。
注意事项:

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