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土壤漆酶(Soil Laccase,SL)试剂盒

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  • DM-SOIL1058
  • 上海
  • 2026年02月03日
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      999

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海笃玛生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20°

    • 规格

      50管/24样

    土壤漆酶(Soil Laccase,SL)试剂盒

    分光光度法50/24样

    注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义

    漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

    测定原理

    漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。

    自备实验用品及仪器

    天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪。

    试剂组成和配制

    试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。

    工作液:粉剂×2瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加25mL试剂一溶解。

    产品细节图片1

    生化试剂盒的通用测定步骤可分为 前期准备、试剂配制、参数设置、校准与质控、样本检测、结果计算 六大核心环节,具体细节如下:

    一、前期准备

    1. 试剂准备:检查试剂盒各组分(R1、R2、校准品、质控品等)是否齐全、无异常(如浑浊、沉淀、变色),按要求从储存环境取出,平衡至室温(通常 20~25℃,平衡时间 5~30 分钟,具体以试剂盒说明为准),轻轻摇匀备用。

    2. 样本准备:确认待检测样本类型符合要求,已按规范完成采集与处理(如血清 / 血浆样本离心分离、组织匀浆制备、尿液离心去沉淀等);若样本需稀释或预处理(如去除干扰物),提前完成相关操作。

    3. 仪器准备:确认使用的生化分析仪 / 酶标仪等仪器符合试剂盒适用要求,提前开机预热,进行仪器清洁(避免残留污染),准备好所需耗材(如反应杯、移液枪头)。

     

    二、试剂配制(如适用)

    1. 即用型试剂:无需额外配制,平衡至室温后直接使用。

    2. 需混合试剂:按试剂盒规定比例(如 R1:R2=4:1、3:1 等)准确混合试剂组分,现配现用,避免提前配制导致试剂失效。

    3. 校准品配制:用指定稀释液(如试剂盒配套稀释液、生理盐水)将校准品稀释至所需浓度梯度(通常 3~5 个梯度,如 0、20、40、80、160 nmol/L),稀释后充分摇匀备用。

     

    三、仪器参数设置

    根据试剂盒要求及所用仪器型号,设置核心检测参数:

    1. 基础参数:检测方法(终点法、速率法、两点法等)、孵育温度(通常 37℃)、反应时间(含孵育时间和检测时间)。

    2. 波长参数:主检测波长(如 450 nm、540 nm,根据反应产物特征吸收峰确定),若存在背景干扰,需设置副波长进行校正。

    3. 液量参数:明确试剂与样本的比例(如 R1 200 μL + 样本 20 μL,孵育后加 R2 50 μL),确保移液体积准确。

     

    产品细节图片2

     

    四、校准与质量控制(保障结果准确性)

    1. 校准程序:将配制好的各浓度梯度校准品依次加入反应杯,按设置的参数进行检测,记录各校准品的吸光度值 / 吸光度变化率;以校准品浓度为横坐标(X 轴)、对应吸光度相关值为纵坐标(Y 轴),采用指定拟合方式(如线性回归、Spline 拟合)绘制标准曲线,要求相关系数 R²≥0.990(具体以试剂盒性能指标为准)。

    2. 质控程序:同步测定高、中、低三个水平的质控品,检测完成后查看质控结果是否在规定靶值范围内;若超出范围,需排查试剂、仪器、操作等环节问题,解决后重新进行校准与质控。

     

    五、样本检测

    1. 按仪器参数设定的试剂 / 样本比例,依次向反应杯加入对应试剂和待检测样本,确保加样顺序正确(如先加 R1 和样本,孵育后再加 R2)。

    2. 按规定的孵育温度和时间完成反应,避免反应不充分或过度反应。

    3. 反应结束后,仪器自动读取各样本的吸光度值 / 吸光度变化率,记录原始数据。

     

    六、结果计算与记录

    1. 依据绘制好的标准曲线,结合样本的吸光度相关值,自动或手动计算样本中被测物的浓度 / 活性(如公式:被测物浓度 =(样本吸光度值 - 空白吸光度值)× 校准品浓度 /(校准品吸光度值 - 空白吸光度值))。

    2. 记录检测结果,同时标注校准曲线相关系数、质控结果等关键信息,便于后续结果追溯与验证。

     

    注意事项:

    产品细节图片3

     

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