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文献和实验操作篇:western blot 之 SDS-PAGE 电泳
电泳篇开始 一、清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 二、灌胶与上样 1. 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。 注意:可以用 1% 琼脂糖在垂直电泳槽的左. 右和下部封边,五分钟后重复一次,这样可以保证基本不漏胶。 2. 按前面方法配 10% 分离胶,加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。灌胶时,可用 10 ml 枪吸取 5 ml 胶沿玻璃
相关专题 Mini Protean 3 Cell 小型垂直电泳简介: 凝胶数:1 或2玻板尺寸(W x L)短板10.1 x 7.3 cm间隔板10.1 x 8.2 cm凝胶大小(W x L) 手灌胶:8.3 x 7.3 cm; 预制胶: 8.6 x 6.8 cm典型上层缓冲液体积120 ml典型下层缓冲液体积180 ml典型SDS-PAGE电泳 时间45 min ( 200 V 恒压)建议电源
95℃的温度煮沸混合好的 BSA样品、预染标记和 ProMarker,5分钟。 •向凝胶中装载样品前,用100μl的移液器轻轻抽放缓冲液冲洗井孔让样品孔更平滑。在把样品放入凝胶前,做简单离心与混匀保证蛋白溶液浓度不变。在每个孔中注入10μl的蛋白质样品(图 12)。 •将安全盖安装到槽顶部,并将电极导线连接至电源(图 13)。 •开始电泳:90 V运行60分钟,130V再运行60分钟。 •电泳后,将胶铲插入到两玻璃板之间,轻轻来回撬动直到两板分开,把凝胶从玻璃板上移
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