小鼠杂交瘤细胞抗CD2完培

以单克隆抗体为基础的免疫治疗

―杂交瘤技术、DNA重组技术等。       单抗的制备首先将抗原注射人小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B细胞，与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，因此，它不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力，还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。由此可以获得足够数量的细胞。   单抗的制备过程       1，抗细胞表面分子的单抗  这类抗体能识别和结合表达特定膜表面分子的细胞

单克隆抗体制备

1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来

单克隆抗体的制备过程

resin一般都泡在20%乙醇中，有的还有特殊的保护剂，使用前需要将它们去掉，简单的方法是把填料装进洗净的纯化柱，然后再用约10倍体积的PBS洗涤一至三次，也可以用PBS在离心管里洗涤，洗完一次后再离心去掉洗涤液，再进行下一轮洗涤。 （2）上腹水。 从小鼠身上采到的腹水往往含有油脂以及体细胞和杂交瘤细胞，因此上柱前需要做一个简单的处理，一般是将腹水先进行离心，离心一般选择5000 g离心20min左右，离心完后，油脂等杂质漂浮在腹水上面，细胞等其它较重的成份则沉在底部，取中间的清澈的腹水即可