牛蒡酚F

RT-PCR 原理与实验技术

温度一般是较低 Tm 值减去 5～10 度。 c.3‘ 端要求：3’ 端必须与模板严格互补，不能进行任何修饰，也不能有形成任何二级结构的可能。末位碱基是 A 时错配的引发效率最低，G、C 居中间，因此引物的 3’ 端最好选用 A、G、C 而尽可能避免连续出现两个以上的 T。 d.引物自身二级结构：引物自身不应存在互补序列，否则会自身折叠成发夹状结构或引物自身复性。 e.引物之间的二级结构：两引物之间不应有多于 4 个连续碱基互补，3’ 端不应超过 2 个。 f.同源序列：引物与非特异扩增序列的同源性应小于

离子色谱仪改善分离度的方法之选择适当的淋洗液

离子色谱仪分离是基于样品离子和淋洗离子之间对树脂有效交换容量的竞争，为了得到有效的竞争，样品离子和淋洗离子应有相近的亲和力。 一、分离弱保留离子的淋洗液： 用CO32ˉ或HCO3ˉ作淋洗液时，在Clˉ之前洗脱的离子是弱保留离子，包括一价无机阴离子、短碳链一元羧酸和一些弱离解的组分等。 对乙酸、甲酸、Fˉ和Clˉ等分离应选用较弱的淋洗离子，常用的弱淋洗离子有HCO3ˉ、OHˉ和B4O72ˉ。由于HCO3ˉ和OHˉ易吸收空气中CO2，CO2在碱性溶液中会转变成CO32ˉ，CO32

RT-PCR原理与实验技术

进行任何修饰，也不能有形成任何二级结构的可能。末位碱基是A时错配的引发效率最低，G、C居中间，因此引物的3’端最好选用A、G、C而尽可能避免连续出现两个以上的T。 d.引物自身二级结构：引物自身不应存在互补序列，否则会自身折叠成发夹状结构或引物自身复性。 e.引物之间的二级结构：两引物之间不应有多于4个连续碱基互补，3’端不应超过2个。 f.同源序列：引物与非特异扩增序列的同源性应小于连续8个的互补碱基存在。g.5’端无严格限制：5’末端碱基可以游离，但最好是G或C，使PCR产物的末端