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500ml
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文献和实验% SDS 890mL dH2 O Maleic Acid Buffer (1L) 11.61g Maleic Acid 8.766g NaCl Fill with dH2 O *check pH 7.5 with NaOH pellets (~7g) *Autoclave* Diluting Ab 1:10,000 (30mL) 3mL Blocking Buffer stock
) 1× 用NaOH调pH为7.5,DEPC处理。 (注:调节PH时,需要的碱较多,可以直接加入固体粉末约2克。) 0.1M maleic acid 5.8g 0.15M NaCl 4.4g 6. BufferⅡ:Blocking solution 1% (100ml) Blocking Reagent 1g,加入100ml maleic acid buffer,60℃溶解1小时,加入100ul DEPC处理,灭菌。 7. 洗液Ⅰ (500ml) 2×SSC,0.1%SDS
核固红复染2min → 常规脱水透明中性树胶封片(与免疫组化相同) 三、注意事项 1) RNA杂交时,杂交前所用试剂均需用DEPC处理,所用器皿需150℃烤以去除RNA酶。 2) DEPC处理双蒸水或其他试剂:蒸馏水或配好的试剂中加入0.1%DEPC → 充分振摇使油性的DEPC溶解 → 高压灭菌30min×2次 → 4℃保存 3) 所需试剂储备: 1M 马来酸(Maleic acid) PH7.5 0.5M Tris-Cl PH9.5 5M NaCl 1M MgCl 10
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