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HARA-B 人肺鳞状细胞癌细胞

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  • ¥1600
  • SAIOS(赛奥斯)
  • 中国武汉
  • CL-510h
  • 2026年01月30日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
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    • 英文名

      HARAB

    • 库存

      999

    • 供应商

      武汉赛奥斯生物科技有限公司

    • 肿瘤类型

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    • 运输方式

      常温/干冰

    • 年限

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    • 生长状态

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    • 规格

      1×10⁶cells

    细胞介绍

          细胞系来源于HARA细胞系,高表达PTHrP。

    细胞特性

    来源:肺

    形态:上皮细胞样,贴壁生长

    含量:>1x10cells

    规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

    用途:仅供科研使用

    细胞运输保存及注意事项


    复苏细胞

    冻存细胞

    包装

    充液的T25细胞培养瓶

    1mL冻存管

    运输条件

    常温

    干冰

    保存方式

    75%酒精消毒瓶壁置于37恒温细胞培养箱

    -80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏

    注意事项

    ① 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们;

    ② 请在45X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照,10X20X2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据;

    ③ 贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收;

    ④ 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶12传代

    培养基及培养冻存条件准备:

    完全培养基

    RPMI-1640培养基+优质胎牛血清 10% FBS+1% P/S

    培养条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%温度:37培养箱湿度为70%-80%

    冻存

    55% 基础培养基 + 40%FBS+ 5%DMSO

    细胞复苏、传代、冻存操作

    (一)冻存细胞的复苏

    将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4~6mL完全培养基的离心管中混合均匀,1000rpm/min离心3~5min,弃去上清液加入1mL完全培养基重悬细胞后均匀铺于含6~8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中,置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况。

    注意:建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩,避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。

    (二)细胞传代

    ① 待细胞密度达到80%~90%时,即可进行传代培养。

    ② 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸净残余的PBS

    ③ 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落,即可轻拍培养瓶至细胞全部脱落。迅速拿回操作台,加入2倍体积的、10%FBS的培养基终止消化

    ④ 将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min离心3-5min,弃去上清液

    ⑤ 向细胞沉淀中加入1~2mL完全培养基重悬细胞,轻吹混匀。将细胞悬液按11比例均匀铺于2个新的培养瓶/皿中添加6~8mL完全培养基,置于37℃恒温细胞培养箱中培养后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

    (三)细胞冻存

    ① 细胞冻存时,步骤同细胞传代的①~④,细胞计数后,加入配制好的细胞冻存液,重悬细胞,按照1×106 ~ 1×107个细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

    ② 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用

    注意事项:

    所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    Zhao D, Zhao H, He Y, et al. BMSC reduces ROS and inflammation levels by inhibiting TLR4/MYD88/NF-κB signaling axis to alleviate dry eye[J]. 2023.
    相关实验
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