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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
HARAB
- 库存:
999
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
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- 细胞类型:
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- 品系:
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- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
人
- 免疫类型:
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- 细胞形态:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
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- 生长状态:
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- 规格:
1×10⁶cells
细胞介绍
细胞系来源于HARA细胞系,高表达PTHrP。
细胞特性
来源:肺
形态:上皮细胞样,贴壁生长
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
用途:仅供科研使用
细胞运输、保存及注意事项
复苏细胞 |
冻存细胞 |
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包装 |
充液的T25细胞培养瓶 |
1mL冻存管 |
运输条件 |
常温 |
干冰 |
保存方式 |
75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒温细胞培养箱 |
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 |
注意事项 |
① 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们; ② 请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照,10X和20X各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据; ③ 贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收; ④ 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。 |
|
培养基及培养冻存条件准备:
完全培养基 |
RPMI-1640培养基+优质胎牛血清 10% FBS+1% P/S |
培养条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃;培养箱湿度为70%-80% |
冻存液 |
55% 基础培养基 + 40%FBS+ 5%DMSO |
细胞复苏、传代、冻存操作
(一)冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4~6mL完全培养基的离心管中混合均匀,1000rpm/min离心3~5min,弃去上清液。加入1mL完全培养基重悬细胞后,均匀铺于含6~8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中,置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况。
注意:建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩,避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。
(二)细胞传代
① 待细胞密度达到80%~90%时,即可进行传代培养。
② 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸净残余的PBS。
③ 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落,即可轻拍培养瓶至细胞全部脱落。迅速拿回操作台,加入2倍体积的、含10%FBS的培养基终止消化。
④ 将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min离心3-5min,弃去上清液。
⑤ 向细胞沉淀中加入1~2mL完全培养基重悬细胞,轻吹混匀。将细胞悬液按1:1比例均匀铺于2个新的培养瓶/皿中,添加6~8mL完全培养基,置于37℃恒温细胞培养箱中培养。后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
(三)细胞冻存
① 细胞冻存时,步骤同细胞传代的①~④,细胞计数后,加入配制好的细胞冻存液,重悬细胞,按照1×106 ~ 1×107个细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
② 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项:
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验化,其他已知细胞松弛素 B还可抑制糖的输送,可以考虑细胞松弛素 B与细胞膜间的相互作用。此外还分离出数种具有类似结构和功能的物质,分别命名为细胞松弛素 A、 C、 D、 E、 F。
细胞色素b563 cytochrome b563 亦称细胞色素 b6 。存在于高等植物至藻类的叶绿体中,与类囊体膜结合紧密。含有原正铁血红素,氧化还原 (β带)和 434nm(γ带或 So- ret带)。为发动光合磷酸化的环状电子传递系统的一个成分,可被光化系统Ⅰ所还原和氧化。
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