NovoBiotin Competent E.coli

感受态细胞 competent cells

野生型 E.coli 并不容易转化，这是由于细菌产生一种酶能迅速降解进入的外源 DNA 。经过多年的努力，科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源 DNA 的效率。那就是用化学方法处理细胞，使其改变膜对 DNA 的通透性。这种细胞就称为感受态细胞，即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术，它对于我们利用体外 DNA 重组技术来了解真核和原核生物的基因功能特别重要。细菌的转化有两种类型：一种是自然转化（ natural transformation

Frozen competent E. coli cells 【Carnegie Institution of Washington】

Inoculate a 5ml overnight of E.coli in LB+20 mM MgSO4. Next morning,inoculate 250 ml LB+20 mM Mg++ in a 2L flask with about 2ml overnight culture.Grow at room temp (23℃)with good aeration (250rpm)to an A600 of 0.4-0.6.Temp is important

Transformation DNA fragments (or plasmid DNA) into competent E. coli

Transformation DNA fragments (or plasmid DNA) into competent E. coli * Caution: Use aerosol protecting tips if selection of transformed cells is not based on X-gal strategy. 1.Remove competent cells (E.coli DH5aTM from GIBCO BRL) from -70 ℃