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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50万
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
新西兰大白兔
- 组织来源:
肺动脉
- 相关疾病:
无
- 物种来源:
兔
- 免疫类型:
不详
- 细胞形态:
梭型
- 器官来源:
肺
- 运输方式:
新鲜或干冰
- 年限:
成年
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25方瓶
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
1、传代前24h先将组织块去除:等到细胞覆盖瓶底80%以上后进行组织块去除操作。可用弯头玻璃吸管将组织块轻轻挑起吸出,确保无组织块留下,以防坏死污染。2、胰酶消化:倒掉旧培养液,用D-HANKs液清洗两边,加入已预热(37度)10min的0.25%胰酶消化液2ml,2-3min后镜下观察,发现胞质收缩,细胞间隙增大,立即用含胎牛血清的培养液终止消化。3、弯头吸管吹打细胞:吹打一定时间后到镜下观察,在没吹打起细胞区域继续吹打,动作要柔和。4、离心:2000转5min。倒掉上清液,加入培养液,吹
实验材料: 1. 正常大兔主动脉 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ 4. 细胞培养瓶(T25) 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 网筛(100目) 7. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 处死大兔,分离出主动脉,放入预冷的含双抗的1×PBS(pH=7.2)反复清洗3次。以洗去
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