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TSA多重免疫荧光染色技术服务

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  • 酪酰胺信号放大(TSA)是一种基于辣根过氧化酶(HRP)的催化活性对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。原理为酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(已标记荧光的酪胺在HRP催化H2O2下形成共价键结合位点)产生的大量酶促产物与目标蛋白的酪氨酸残基共价结合,从而使目标蛋白标记上特异的荧光。
  • 武汉
  • 2026年01月21日
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      EnkiLife

    • 服务名称

      TSA多重免疫荧光染色技术服务

    TSA技术服务

    技术介绍

                酪酰胺信号放大(TSA)是一种基于辣根过氧化酶(HRP)的催化活性对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。原理为酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(已标记荧光的酪胺在HRP催化H2O2下形成共价键结合位点)产生的大量酶促产物与目标蛋白的酪氨酸残基共价结合,从而使目标蛋白标记上特异的荧光。

     

    实验原理

    产品细节图片1产品细节图片2

     

    服务项目

    分类 服务项目 备注
    IF荧光染色 免疫荧光单标 不含一抗,含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI
    免疫荧光双标 常规为不同种属一抗分别标记;不含一抗,含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI
    免疫荧光三标 不含一抗,含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI
    免疫荧光四标 不含一抗,含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI;
    需要提供多余白片做单标预实验。例如:10例样本做5标,其中目的片子提供10张,另选择样本A提供5-10张白片,分别做5色的单标,预实验成功再进行正式实验
    免疫荧光五标
    荧光全景扫描 荧光单标 双色全景扫描 提供读片软件及原始相关文件,荧光扫描波长范围
    荧光双标 3色全景扫描
    荧光三标 4色全景扫描
    荧光四标 5色全景扫描
    荧光五标 6色全景扫描
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    超多标染色 免疫荧光6标+扫描 实验检测+图像采集
    免疫荧光7标+扫描
    免疫荧光8标+扫描
    免疫荧光9标+扫描
    免疫荧光10标以上
    病理分析(5标及以下) 免疫组化(阳性细胞数量) 全景扫描或者截图3张
    包含:阳性细胞比率、阳性细胞密度、平均光密度值、H-Score。一次分析即可获取该指标阳性细胞数量相关参数的四个数值,以上相关参数均可用于评价阳性强弱多少。
    免疫组化(阳性面积) 全景扫描或者截图3张
    包含:H-score、平均光密度值、阳性面积比、阳性面积密度。一次分析即可获取该指标阳性细胞数量相关参数的四个数值,以上相关参数均可用于评价阳性强弱多少。
    免疫荧光(阳性细胞数量) 全景扫描或者截图3张
    按靶标数量,累计计费。包含:阳性细胞比率、阳性细胞密度、平均光密度值。一次分析即可获取该指标阳性细胞数量相关参数的三个数值。以上相关参数均可用于评价阳性强弱多少。
    免疫荧光(共定位计数) 全景扫描或者截图3张
    可分析每两个指标或多个指标的共定位阳性面积相关参数,可根据需求选择需要共定位分析的指标组合,累计计费。
    免疫荧光(临近度分析) 全景扫描或者截图3张
    统计A细胞指定范围内,B细胞分布数量;按每张图片分析的组合数量,累计计费
    免疫荧光(细胞密度分析) 全景扫描或者截图3张
    从对象数据中测量特定半径内选定的细胞密度,累计计费
    免疫荧光(浸润分析) 全景扫描或者截图3张
    统计指定的免疫细胞在肿瘤边界内外一定范围内的分布数量;按每张图片分析的免疫细胞类型数量,累计计费,仅针对炎症指标(例:F4/80,CD68等)

     

    案例分析

    产品细节图片3

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    产品细节图片4

    检测样本:大鼠肾脏

    AQP4:在内髓集合管和皮质/外髓集合管的主细胞可见阳性染色;

    CD31:广泛用于标记血管内皮,肾小球毛细血管内皮、各级血管内皮中均有表达;

    TGFβ1:在高血压、纤维化模型中表达显著上调,肾小球上皮细胞(主要是足细胞)、间质成纤维细胞中表达;

    Zo-1:作为紧密连接支架蛋白,维持肾小球滤过屏障和肾小管极性;

    Collagen I:在纤维化或硬化模型中大量沉积于间质及肾小球。

    产品细节图片5

     

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    • TSA多重免疫荧光染色的实验步骤

      实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原

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