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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 品系:
人/动物原代细胞
- 运输方式:
活细胞包邮/冷冻需加干冰
- 规格:
5*10⁵Cells/T25培养瓶
细胞详述
室管膜是覆盖在各脑室、中脑水管、脊髓中央管腔面的上皮,由一层立方形、柱状或扁平上皮细胞构成,来源于胚胎时期神经管的室管膜层,是胚胎神经上皮的遗留物。
神经干细胞是存在于哺乳动物体内的一种具有多向分化潜能和自我更新能力的细胞,能分化为神经元和神经胶质细胞,其在神经系统疾病中的替代治疗前景广阔。
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常脑或脊髓组织。
2) 细胞鉴定:Nestin免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:集落,克隆球状,半贴壁半悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用大鼠原代室管膜细胞专用培养基产品编号:iCell-n021-002r) 作为体外培养大鼠原代室管膜细胞的培养基。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验所示即为大鼠原代足细胞。按顺序:图1,2是培养7天传代前的图片,小球周围爬出很多细胞。图3,4是传代第二天细胞情况,过筛后仍有小的组织滤过。图5是传代7天足细胞完全分化图片。 由于本人实验刚有进展,好多图片制作不理想,后续的细胞免疫荧光坚持在做,失败过两次,出结果后再发,不过导师说了就是足细胞! 图1 图2 图3 图4 图5
的[5],但细胞得率均较低,而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长,而且工作量大、过程繁琐且费用高[1],进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
液体配制:硼酸硼砂缓冲液:0.05M四硼化钠45ml,0.2M硼酸55ml,pH8.4;胰酶-EDTA消化液:胰酶-0.125g;EDTA-0.2g;D-Hanks平衡盐液定容至100ml所用的培养板、培养瓶或玻片预先经100μg/L多聚赖氨酸硼酸盐缓冲液于37℃包被4h,三蒸水洗三遍晾干备用。操作步骤如下:1、孕16d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤,依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜,无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2、在解剖显微镜下分离并取出胚胎
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