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- 2025年12月17日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 英文名：
Pulchinenoside B
- 库存：
50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
135247-95-9
- 规格：
2mg
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文献和实验动物模型构建CRISPR-Cas9 系统作为最新一代基因编辑技术，能够简便高效地实现基因组精确 修饰，是制备哺乳动物疾病模型的重要工具。目前科学家利用 CRISPR-Cas9 技术在动物模型，如小鼠、大鼠、猪 和猴等研制方面做出一系列重要工作。如科学家们将 CRISPR-Cas9 系统导入小鼠受精卵，成功获得了有特定基因突变的小鼠模型，并获得近乎 100% 的基因靶向突变效率，极大地降低了基因编辑小鼠模型制备的难度和成本，有望被广泛应用。背景：使用自主研发的sgRNA设计平台为一个基因位点设计
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
继续培养。7. 14000rpm 离心收取细胞 30s。加入 20 - 60ul solution A 裂解细胞。95 ℃ 加热 10 min, 然后加入同样体积的 solution B, 涡旋震荡一下, 13000rpm 离心 0 min。取上清做基因型鉴定的模板。8. 做完基因型鉴定后，只继续培养基因敲除的细胞克隆。9. 当基因敲除的细胞克隆长满时，胰酶消化，进行细胞计数。以 40 个细胞每 10 毫升进行 10 倍梯度稀释。10. 第 9 步中培养液也就是条件刺激培养液，也就是收集第 9 步
到的，假如单独敲除这三个基因都没有表型，那我岂不是前功尽弃？那么大的投入可能会没有任何回报，我真的着急了。 好在邦耀给出了一个看起来可行的方案：Cas9在两个位点切开形成双链断裂之后，细胞会启动NHEJ的修复方式将断裂的双链DNA连接起来，这样会有一定概率删除两个靶点之间的序列。我的这个小鼠虽然跨度为95Kb，但他们相信设计2个sgRNA，将中间片段整基因组删除应该是可以成功的。 经过2个月焦虑不安的等待，我终于等到了好消息：95Kb的片段成功的在F0代小鼠里面删除了，而且同时得到了2只
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