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PBS-501
PBS-501巴罗克PBS超低内毒素缓冲液(1X),无菌,pH7.4,内毒素水平≤0.05EU/Ml,500ml/瓶,10瓶/箱BIOLOGIX
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文献和实验胎牛血清:(进口血清)要求剖腹取胎制成。 国内厂家往往不能做到,经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。 根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为: (1).特级胎牛血清:40纳米过滤,内毒素含量≤10 EU,血红蛋白含量≤10 mg/dl。 (2).优等胎牛血清:经过3次100纳米过滤,内毒素含量≤25 EU/ml,血红蛋白含量≤25 mg/ml。 (3).标准胎牛血清:3次100纳米过滤,低内毒素,低血
洗涤一次。菌体洗涤可以去除一些培养基中的杂质,及代谢产物,减少对后续纯化的影响。如果菌体已经冻存过,冻融的菌体可能有部分破碎,就不要洗涤菌体了。 小量菌体的悬浮可以用5ml的枪头吹打,再磁力搅拌。大量菌体的悬浮可以用分散乳化机。破菌缓冲液的用量一般为1∶10—1∶20,即1g湿菌体用10—20ml的破菌缓冲液。 (2)破菌缓冲液的选择 选择何种破菌缓冲液,应该与后续的纯化方法密切相关,不能一刀切。而且,破菌缓冲液还与是否可溶表达相关。对于可溶表达的重组蛋白,一般就选用第一步层析纯化的平衡
破碎 (1)破菌前处理 诱导表达的菌体在发酵离心后,最好先用PBS缓冲液或其它缓冲液立即洗涤一次。菌体洗涤可以去除一些培养基中的杂质,及代谢产物,减少对后续纯化的影响。如果菌体已经冻存过,冻融的菌体可能有部分破碎,就不要洗涤菌体了。 小量菌体的悬浮可以用5ml的枪头吹打,再磁力搅拌。大量菌体的悬浮可以用分散乳化机。破菌缓冲液的用量一般为1∶10—1∶20,即1g湿菌体用10—20ml的破菌缓冲液。 (2)破菌缓冲液的选择 选择何种破菌缓冲液,应该与后续的纯化方法密切相关,不能
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