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广州艾迪基因科技有限责任公司
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文献和实验wj1989113 最近一直在做慢病毒载体，用的是第二代的三质粒系统，目的片段是一个肝细胞的转录因子。载体构建好之后，包装了一批病毒。然后拿慢病毒感染肝癌细胞株3B和Huh7细胞，想通过PCR和Western验证病毒的表达情况。出现了一些问题： 1、每次拿慢病毒感染肝癌细胞株，荧光都很亮，但是做PCR或者Western之后，加对照病毒GFP组的细胞和目的病毒无差异。（条带都较亮）尤其是Western，几乎没有差异。 2、感染
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
毒用 pspAX2 + pMD2.G 包装。 大基因（>4kb）报告基因组合建议用 GV747 大基因专用载体，5k 以内承诺滴度与出毒。 方案吃不准，可以先把要标记的基因、想要的荧光颜色和是否需要定量发给吉凯基因，让售前帮你配多报告基因载体。官网： 一句话收尾 EGFP和Luc解决的是两类问题。 参考文献与技术资料 荧光素酶报告系统优缺点对比（高灵敏、无背景、非侵入；无法空间定位、依赖底物），通用分子生物学共识。 拆分 GFP（GFP1-10 / GFP11）蛋白互补技术，标准序列见 Addgene
静脉注射，病毒注射总量为 1×10^11 vg/小鼠。Luc 的表达由 cTnT 启动子控制。（DOI: 10.1038/gt.2010.105） 图 4. 五种 AAV 血清型在小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为左心室前壁注射，病毒注射总量为 5×10^10 vg/小鼠，体积为 10μL。Luc 的表达由 cTnT 启 动子控制。（DOI:10.1002/jgm.1576） 图 5. 五种 AAV 血清型以不同剂量注射至小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为颈静脉注射。EGFP
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