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天津国晟中源科技有限责任公司
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实验犬骨髓炎模型
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次
实验犬骨髓炎模型
犬胫骨中段皮质厚度、骨髓血供来源与人类成人相似度超80%,对骨感染的病理反应与人类一致,能稳定复现局部红肿流脓、骨痛跛行、死骨形成、骨皮质破坏等核心特征,适合如抗菌药、骨修复剂疗效评价、清创植骨手术的临床前验证及骨感染修复机制研究。
一、实验方法
1、术前准备
犬种选择:优先选用成年比格犬;
术前筛查:
肾脏 CT 示肾实质无占位 / 畸形;肾穿刺病理示肾小管完整、肾间质无炎症浸润;血清炎症因子正常;肾小球滤过率(GFR)≥80mL/min・1.73m²
实验材料与仪器准备:
造模试剂:菌液、头孢曲松钠、2% 利多卡因;
器械设备:骨科手术器械套装、骨钻、动物专用后肢负重装置、X 线机、CT 机、MRI 机、病理切片机、细菌培养箱、骨密度检测仪;
2、分阶段造模
阶段 1:菌骨内定植建立感染基础
(第 1 天)
定植操作:
犬俯卧固定,左侧后肢胫骨中段局部注射 2% 利多卡因麻醉,做 1cm 纵切口,钝性分离皮下组织与肌肉,暴露胫骨皮质;
用 2mm 骨钻垂直于骨皮质钻孔,用无菌生理盐水冲洗钻孔通道,清除骨屑;经钻孔处插入 22G 穿刺针,缓慢注入 1×10⁸CFU/mL 菌液 0.5mL,注射后停留 10 秒再拔针,用骨蜡封闭钻孔;
逐层缝合肌肉、皮下组织与皮肤,术后 3 天肌肉注射头孢曲松钠;第 14 天胫骨穿刺液细菌培养示菌阳性,进入阶段 2。
阶段 2:骨皮质机械损伤破坏骨屏障
(第 15 天)
损伤操作:
沿原切口切开,暴露胫骨钻孔区域,用骨钻在原钻孔周围新增 2 个钻孔,轻轻刮擦钻孔周围骨皮质内壁;
刮擦后用生理盐水冲洗骨髓腔,清除坏死骨组织与脓液;第 21 天 X 线示胫骨皮质局部透亮区,局部红肿明显,进入阶段 3。
阶段 3:慢性力学应激加重骨破坏与炎症迁延
(第 22-84 天)
应激方案:
每日在犬造模侧后肢脚踝处绑缚负重沙袋,让犬自由行走、站立进食,每日持续 4 小时;
每 2 周复查胫骨影像学与炎症指标;第 84 天 CT 示胫骨死骨形成,完成造模。

二、注意事项
1、致病菌剂量控制:菌液浓度>1×10⁹CFU/mL 易致急性败血症,需稀释至 1×10⁸CFU/mL;若出现全身感染症状,立即静脉注射万古霉素干预。
2、骨皮质损伤程度:钻孔深度>2cm 或数量>4 个,易致胫骨骨折,若术后 1 周出现骨折前兆,用石膏固定后肢 2 周。
3、力学负荷调节:负重>体重 15% 易致后肢关节损伤,需固定 12% 体重;若犬出现拒绝负重,暂停负重 3 天,降低重量至 8% 后重启。
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