动物实验丨龋齿动物模型

龋齿动物模型

一、原理：

龋病由细菌感染导致，涉及细菌、食物和宿主三个因素。变形链球菌等细菌、淀粉与蔗糖食物、牙发育与唾液特性，共同影响龋病发生。

龋病动物模型模拟这些因素，以研究预防策略。

二、实验材料：

实验动物：

Wistar大鼠

实验材料：

金刚砂片、变形链球菌、Keyes 2000#饲料、氨苄西林（或复合抗生素）、MSB固体培养基、2%氢氧化铵溶液、0.4%紫脲酸铵染液

三、操作步骤：

1、动物预处理：

选取18～20日龄Wistar大鼠，随机分组。

适应性喂养2天，同时在饮水和饲料中加入氨苄西林或复合抗生素的Keyes 2000#饲料。

2、细菌接种：

3天后，使用新鲜培养18h的变形链球菌（浓度为2 × 109 CFU/ml）连续接种于大鼠牙面。

使用棉签涂拭菌液0.2 ml，涂拭后1小时内禁食，30分钟后再接种1次。

3、饲养与观察：

持续使用Keyes 2000#饲料饲养大鼠至实验结束。

定期观察和记录大鼠的口腔健康状况。

4、结果分析：

在鼠龄56～63天时处死大鼠。

分离上下颌骨，浸泡于2%氢氧化铵中30分钟，清洗后干燥。

将颌骨置于0.4%紫脲酸铵染液中12小时，清水冲洗后自然干燥，避光保存。

使用金刚砂片沿上下颌磨牙颌面近远中向矢状片切，清洗残屑后自然干燥。

四、注意事项

1、致龋饲料Keyes 2000#需喂养至实验结束。

2、细菌接种前后，需用无菌棉签采集大鼠口腔内牙菌斑样品，经MSB固体培养基以确定接种效果。

3、实验过程中需根据Keyes评分标准，在体视显微镜下对每只大鼠的釉质龋（E）、牙本质浅龋（Ds）、牙本质中龋（Dm）进行评分和评价。