二苯乙酮肟(帕瑞昔布钠中间体) (CAS:952-06-7)

做制剂研发时候出现的低级问题(二)

做240多瓶，我们就按105％投料，然后经过超虑以后，测中间体的含量的时候，含量大大的下降，下降到91％，我们开始找不到原因，最后才发现，超虑的管道很长，在超虑之前首先要洗管道，所以里面会有部分水残留，我们的药液又少，所以在超虑的时候被稀释了，最后我们计算了一下，我们只有1000多ml的药液，只要200多ml的水残留就可以是含量下降到这种程度。     溶出度较难的片剂，想了很多办法，也花了很长时间，终于达到标准要求。正在高兴的时候忽然发现，溶出度检测要求用桨法，而我仍然用的转篮法，结果前面做的很多

蛋白复性（二）-基因重组蛋白质的体外复性

性结合，蛋白质无法达到足够的溶解度等。 2、 重组蛋白的氨基酸组成，一般说来含硫氨基酸越多越容易形成包涵体。 3、 重组蛋白所处的环境：发酵温度高或胞内pH接近蛋白的等电点时容易形成包涵体。 4、 重组蛋白是大肠杆菌的异源蛋白，由于缺少真核生物中翻译后修饰所需酶类，致使中间体大量积累，容易形成包涵体沉淀。 5、 有报道认为，丰富的培养基有利于活性蛋白质的表达，当培养条件不佳时，容易形成包涵体。 减少包涵体形成的策略 1、 降低

7.19 又来反转？Nature 子刊研究证实没有长寿基因更健康！

将 sgRNA 和 Cas9 mRNA 或蛋白质在二细胞胚胎期一次注射至其中一个卵裂球的研究策略。王松灵教授团队利用该策略成功构建了 Slc17a5 出生后致死基因敲除嵌合小鼠，该小鼠可以携带致死基因突变并传代繁育，并发现 Slc17a5 基因敲除可致成年小鼠颌下腺组织内硝酸盐与唾液酸的转运明显低下。为了验证该策略的广谱适用性，该研究团队随机选取了另外一个出生后致死基因 Ctla4 和两个胚胎致死基因 Virma 及 Dpm1，利用该策略构建了这些基因的敲除嵌合小鼠，发现该类小鼠均可携带这些致死