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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
2×RealStar Green Fast Mixture(with ROX II)
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件:
常温或冰箱保存
- 规格:
1.1 ml/1.1 mlx 5/1.1 mlx 10
【产品概述】
本产品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行实时荧光定量PCR的专用2×浓度预混液。产品含有优化浓度的 HotStart Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。HotStart Taq DNA Polymerase高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq酶结合,抑制Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活,不会阻碍之后的Taq Polymerase反应,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。优化浓度的SYBR Green I 荧光染料,特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,荧光可以在退火或延伸阶段测定。
本产品为2×预混荧光定量PCR反应体系,使用时只需加入模板、引物和水,使其工作浓度为1×,即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度地减少人为误差、节约PCR实验操作时间、降低污染几率。
【产品规格及组分】
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 2×RealStar Green Fast Mixture | ZK301-01 | 1.1 ml |
| ZK301-05 | 1.1 ml x 5 | |
| ZK301-10 | 1.1 ml x 10 | |
| 2×RealStar Green Fast Mixture with ROX | ZK303-01 | 1.1 ml |
| ZK303-05 | 1.1 ml x 5 | |
| ZK303-10 | 1.1 ml x 10 | |
| 2×RealStar Green Fast Mixture with ROX II | ZK304-01 | 1.1 ml |
| ZK304-05 | 1.1 ml x 5 | |
| ZK304-10 | 1.1 ml x 10 |
*注:各个产品适用的机型如下:
A303: ABI Prism7000/7300/7700/7900HT和ABI Step One /ABI Step One Plus荧光定量PCR仪。
A304: ABI Prism7500/7500 Fast荧光定量PCR仪 , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000 , Agilent Technologies Mx3000P荧光定量PCR仪。
A301: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System,Corbett Rotor-gene 6000荧光定量PCR仪等。
**不同仪器所需ROX Renference Dye不同,如需添加,需致电单独配带:
| 货号 |
规格 | 备注 | |
| ROX Reference Dye ROX 参考荧光染料 |
ZK320-01 | 40 μl | 1 ml qPCRMix选送 |
| ZK320-05 | 200 μl | 5 ml qPCRMix 选送 | |
| ZK320-10 | 400 μl | 10 ml qPCRMix 选送 | |
| ROX Reference Dye II ROX 参考荧光染料 II |
ZK321-01 | 40 μl | 1 ml qPCRMix选送 |
| ZK321-05 | 200 μl | 5 ml qPCRMix 选送 | |
| ZK321-10 | 400 μl | 10 ml qPCRMix 选送 |
【注意事项】
1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。2. 尽可能减少RealStar Green Fast Mixture在光下的曝露时间,长时间的曝光可导致荧光信号强度的丧失。
3. 本品不能用于杂交探针法。
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
等)、miRNA 加尾法逆转录试剂盒做反转录:适用于短片段 RNA(主要为 miRNA)的加尾法。 4)qPCR 检测 采用 Umibio 2×SYBR Green qPCR 试剂:预混 ROX1 型适用于 ABI 5700 等设备、预混 ROX2 型适用于 ABI 7500 等设备。 5)数据分析:采用仪器自带的 QPCR 分析软件进行数据分析 可以看到 qPCR 检测外泌体可行且可靠,但实验过程并不简单,因此我们对经常会遇到的问题及解答也进行了整理,帮助大家更好的完成实验。 qPCR检测外泌常见问题及解决
Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
设置(program setup)。我们以 ABI StepOne为例,详细看一下反应设置: A. 首先是实验目的选择:定量还是其他。我们命名为“BioTeke”,进行“定量”实验。 B. 实验方法的选择:我们选用的比较Ct的SYBR Green方法, Fast程序,以cDNA为模板进行。 C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
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