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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
2×ExPfu PCR StarMix with Loading Dye
- 保质期:
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件:
一年
- 规格:
1 ml/1 ml x 5/1 ml x 10
2×ExPfu PCR StarMix with Loading Dye
【产品概述】
2 x ExPfu PCR StarMix为预混的含有优化浓度的ExPfu高保真DNA Polymerase、 dNTPs、 Mg2+、高保真反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、 SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染机率。 PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。 ExPfu高保真DNA聚合酶是一种基于Pfu改造的混合酶,具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的错配碱基。其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase 的35倍,反应速度视模板复杂程度约为2-4kb/min。对于一般性模板可以保证10kb的扩增长度。
【用途】
• 高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等。
【产品组分】
| 2 × ExPfu PCR Mix | 1 ml |
| ddH2O | 1 ml |
【保存条件】
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
【质量控制】• 以λ DNA为模板,可以有效扩增10 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因
• 无内切酶、外切酶污染【注意事项】
ExPfu扩增后的PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化处理的平末端目标载体连接,也可先连接到线性平末端克隆载
体上(如EZ-Blunt Blunt-end Ligation Kit, Cat. No. T170-01),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应
先纯化,再在PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T™ A-Tailing Kit( Cat. No. T173-01)进行。
【相关产品】
| 产品 | 货号 | 规格 | 页码 |
| ExPfu DNA Polymerase | ZK161-01 | 150 U | 034 |
| ZK161-05 | 150 U | 034 | |
| ZK161-10 | 150 U | 034 |
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文献和实验Cyanine Dye Purification Protocol
. 12 mL syringe (1 per dye) Pre-load protocol: Wash Sep-Pak with 10 mL of acetonitrile. Wash with 5 mL of water. Wash with 10 mL of 15 mM TEAA. Sample Preparation, Loading, and Elution: The column
-stop PCR only; see Steps 1-22)SSCP loading dye (for SSCP only; see Steps 23-37)95% (v/v) formamide10 mM NaOH0.25% (w/v) bromophenol blue0.25% (w/v) xylene cyanolTaq DNA polymerase (5 U/µl)TBE Buffer (1X and 5X)Prepare a 5x stock solution in 1 liter
. Add 2µl 10 mg/ml ethidium bromide. Pour gel in tray with tape at ends and 8 tooth comb inset. Allow to set. Take 10µl of the PCR reaction and place on a piece of Saran wrap. Add 2µl 6X loading buffer. Load on gel
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