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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
。 2)RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 具体操作:取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中,加入 800 μl Trizol 试剂,充分混合,裂解 10 min,12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3)反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒:适用于长片段 RNA(如 mRNA、LncRNA
条件下 220g 离心 5min。 19、将类器官沉淀重悬于 700μl 预冷的 DMEM / F12中,使用移液器吹打数次,机械地破坏类器官。 20、将所得细胞悬液重复 8-12 步骤,完成传代。 类器官冻存 21、取 1-4 个孔的类器官,消化离心后取细胞沉淀,加入 1ml 细胞冻存液。 22、将细胞重悬后转移至冻存管中,利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 23、第二天,将样品转移到液氮中长期储存。 类器官复苏 24、将液氮冻存的 OC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻,水浴
Nucleoprotein Protein Extraction Kit 产品说明:本试剂盒提供独特的组份,采用特殊的非离子型去污剂,以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂,能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞,经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白,释放的细胞核能够保持完整,再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性,因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀,EMSA,Pull Down, 转录调控等后续蛋白质或分子生物学相关实验
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