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10000
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海再康
- 保存条件:
室温保存
产品包装:试剂盒组成 D1800-50 D1800-100 储存条件
RNase A 1ml 2ml -20℃
蛋白酶K 1ml 2ml -20℃红细胞裂解液 120ml 120ml×2 RT
溶液A 15ml 2 5ml RT溶液B 15ml 25ml RT小牛胸腺DNA溶液
漂洗液 15ml 15ml×2 RT洗脱液 15ml 30ml RT
吸附柱 50个 100个 RT收集管 50个 100个 RT 说 明 书 1份 1份 RT
注意事项:
1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。
2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
5、绝大多数哺乳动物的全血如人全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白小牛胸腺DNA溶液细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的 pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
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文献和实验度仍继续呈增大的趋势。但RNP则与之不同,在0.14 mol/L的盐溶液中,DNP溶解度很低,而RNP的溶解度仍相当大,因此,通常采用0.14 mol/L的盐溶液来除去RNP,使DNP仍保持在沉淀中,然后使用浓盐溶液(1.7 mol/L浓度以上的NaCl)来提取DNP。 提取出DNA-蛋白质复合体(DNP)后,还必须将其中的蛋白质除去,因此,提取纯化DNA要经过以下四个步骤: 1. 制备细胞核 ; 2. 裂解细胞核 ; 3. 解离DNA—蛋白质复合体; 4. 从可溶性物质中
问: 实验室购买的是西格玛产的小牛胸腺DNA,说明书上说保存温度是2~8℃,而由于我们的粗心,我们将其储存在零下20℃的低温储藏箱内,而我们将其配成溶液后,接下来又存储在0~4℃的普通冰箱里。我们用这个保存条件下的DNA做精密度较高的电化学实验,结果发现毫无效果,有指导老师告诉我有可能因为第一步零下20度太低,“冻死了”,请各位虫友支支招,到底应该在什么温度下保存比较好,或者告诉我小牛胸腺
。所以,在测定核酸物质时均应在固定的pH溶液中进行。核酸的摩尔消光系数(或吸收系数),通常以ε(ρ)来表示,即每升含有一摩尔核酸磷的溶液在260nm 波长处的消光值(即光密度,或称为光吸收)。核酸的摩尔消光系数不是一个常数,而是依赖于材料的前处理、溶液的pH 和离子强度发生变化。它们的经典数值(pH = 7.0)如下:DNA 的ε(ρ)= 6 000 - 8 000RNA 的ε(ρ)= 7 000 - 10 000小牛胸腺DNA 钠盐溶液(pH = 7.0)的ε(ρ)= 6 600,DNA 的含磷量为9.2
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