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大量
- 英文名:
非变性蛋白裂解抽提液
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃保存
- 规格:
50ml/100ml
储存条件:
2-8℃保存。
有效期:一年。
非变性蛋白裂解抽提液产品简介:
非变性蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本,主要用于Western,免疫沉淀和免疫共沉淀等。裂解液中已含常用蛋白酶抑制剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin 和磷酸酶抑制剂。
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| 昆虫膜蛋白提取试剂盒 | 50T |
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文献和实验。特异与非特异性竞争DNA的用量也需优化或滴定,但竞争DNA通常是标记的探针用量的30-100倍(w/w)。 5、用什么凝胶条件将蛋白质/探针复合物和游离的探针分离开? 将结合蛋白或粗制核抽提液和目的探针结合,蛋白/探针复合物和游离探针可在非变性聚丙烯酰胺凝胶中经电泳分离。聚丙烯酰胺的浓度一般为6%,在特定条件下可用高或低的浓度。也可将TGE缓冲液(12.5mM Tris,pH8.3,95mM 甘氨酸,0.5mM EDTA)用于不稳定的蛋白/DNA复合物。在4℃进行结合和电泳实验以阻止不稳
P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳 上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异), 和其它非相关的片段(非特异),来确定
凝胶迁移实验以下问题是以Promega公司试剂盒为例。1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验?凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位
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