胰蛋白酶/EDTA

胰蛋白酶/EDTA使用说明：
以下的操作步骤是最初由Byum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液；这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM（室温）于15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。胰蛋白酶/EDTA不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟，离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中，室温离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 - 260 x g（去除LSM和降低血小板的百分比）。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞，用适当的培养基重悬细胞。
胰蛋白酶/EDTA方法概述：
分离混合血液白细胞早期的方法，总是伴随红细胞聚集，只轻微影响白细胞。通过离心，红细胞密度增加聚集，同时可以从离心管上部收集白细胞。
Byum提出了一种更方便，通过使用Ficoll 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在Ficoll甲泛影钠溶液中分层，低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞，和单个核细胞（淋巴细胞）和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力，修订了Byum方法，MP生物医学公司生产的LSM，方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
胰蛋白酶/EDTA相关产品如下：zk11728 T细胞,CTLL-2细胞
zk11729 T淋巴细胞白血病细胞,HuT78细胞
zk11730 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞
zk11731 T 淋巴细胞白血病细胞) Jurkat,Clone E6-1细胞
zk11732 SV40转染人成骨细胞,hFOB1.19细胞
zk11733 SV40转化的非洲绿猴肾细胞,COS-7细胞
zk11734 SV40永生化的人胚肾上皮细胞,293T细胞
zk11735 SV40T转化的人胚肾细胞（亚系） 293T/17细胞
zk11736 SV40 转染成骨细胞,hFOB 1.19细胞
zk11737 SV40 转化的非洲绿猴肾细胞, COS-1细胞
zk11738 SRSV转化的3T3细胞) SRSV/3T3?细胞
zk11739 SD大鼠骨髓间充质干细胞,SDBMSC细胞
zk11740 RD(恶性胚胎横纹肌瘤细胞)? RD细胞
zk11741 NFS-60细胞,NFS-60细胞
zk11742 mouse N3 mouse N3细胞
zk11743 Mo-MuLv感染的3T3细胞,Mo-MuLv/3T3细胞
zk11744 LLC小鼠 Lewis 肺癌细胞,Lewis细胞
zk11745 Leuwis肺癌细胞,LLC细胞
zk11746 KM小鼠子宫颈癌瘤株 U27细胞
zk11747 KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株 B22细胞
zk11748 KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株 LⅡ细胞
zk11749 KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株 G422细胞
zk11750 K562耐阿霉素细胞株 K562/ADP细胞
zk11751 HPVl6 E6、E7和ras基因共转化的C57BL／C(H-2b)小鼠肺上皮细胞,TC-1细胞
zk11752 HEK293,人胚肾上皮细胞,293A细胞
zk11753 EB病毒转化的绒猴淋巴细胞,B95-8细胞
zk11754 EBV 转化的绒猴白细胞,B95-8细胞
zk11755 EB 病毒转化的B 细胞,CGM1细胞
zk11756 CCL13张氏肝细胞正常 Chang liver细胞
zk11757 C57小鼠黑色素瘤瘤株 ME细胞
zk11758 C3H小鼠骨肉瘤 LM8细胞
zk11759 B淋巴细胞, WEHI 22.1细胞
zk11760 Burkitt's 淋巴瘤细胞,Raji细胞