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- 2025年11月20日
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大量
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6个月
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上海再康
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常温，避光
以下的操作步骤是最初由Byum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液；这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM（室温）于15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。D-Hank’s液 不含Ca、Mg离子、含酚红不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟，离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中，室温离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 - 260 x g（去除LSM和降低血小板的百分比）。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞，用适当的培养基重悬细胞。
D-Hank’s液 不含Ca、Mg离子、含酚红方法概述：
分离混合血液白细胞早期的方法，总是伴随红细胞聚集，只轻微影响白细胞。通过离心，红细胞密度增加聚集，同时可以从离心管上部收集白细胞。
Byum提出了一种更方便，通过使用Ficoll 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在Ficoll甲泛影钠溶液中分层，低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞，和单个核细胞（淋巴细胞）和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力，修订了Byum方法，MP生物医学公司生产的LSM，方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
D-Hank’s液 不含Ca、Mg离子、含酚红相关产品如下：zk10122 小鼠胰岛内皮细胞,MS1细胞,
zk10123 小鼠胰岛β细胞株 Min6细胞
zk10124 小鼠血细胞,WEHI-3细胞
zk10125 小鼠血管瘤内皮细胞,EOMA细胞,
zk10126 小鼠小胶质细胞,BV2细胞
zk10127 小鼠胃癌细胞,MFC细胞,
zk10128 小鼠网织细胞肉瘤 M5076细胞
zk10129 小鼠饲养层上皮细胞,HPT-8细胞
zk10130 小鼠树突状细胞肉瘤细胞,DCS细胞
zk10131 小鼠树突状细胞,DC2.4细胞,
zk10132 小鼠视网膜神经节细胞株细胞,RGC-5细胞
zk10133 小鼠肾足细胞,Mouse podocyte细胞
zk10134 小鼠肾小球系膜细胞,SV40 MES13细胞,
zk10135 小鼠肾小球系膜细胞,MES-13细胞
zk10136 小鼠肾腺癌细胞,RAG细胞,
zk10137 小鼠肾系膜细胞,MC53细胞
zk10138 小鼠肾上腺皮质瘤细胞,Y1细胞,
zk10139 小鼠肾集合管细胞(SV40转化) M-1细胞
zk10140 小鼠肾癌细胞株 RuCa细胞
zk10141 小鼠肾癌细胞,Kert-3细胞
zk10142 小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞,NG108-15 [ 108CC15 ]细胞
zk10143 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞,NG108-15细胞
zk10144 小鼠神经胶质瘤细胞,G422细胞
zk10145 小鼠软骨细胞,ATDC-5-EGFP细胞
zk10146 小鼠乳腺肿瘤细胞,C127细胞,
zk10147 小鼠乳腺癌细胞株 EMT-6细胞
zk10148 小鼠乳腺癌细胞,MA891细胞
zk10149 小鼠乳腺癌细胞,CCC-Ca761-03细胞
zk10150 小鼠乳腺癌细胞,4T1细胞
zk10151 小鼠乳腺癌高转移细胞,MA-891细胞
zk10152 小鼠乳腺 EMT6细胞
zk10153 小鼠乳癌細胞 4T1细胞
zk10154 小鼠肉瘤 S37细胞
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文献和实验相关专题 在众多实验缓冲液中，HBSS显得有点默默无名。HBSS主要用于培养液的配制或清洗细胞，不能单独使用。本文介绍HBSS的配制和使用方法。 HBSS，即汉克斯平衡盐。英文全名Hank's Balanced Salt Solution。D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl， 0.4 g/L KCl
有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank"s常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2的培养条件，Hank"s平衡液仅含有0.35g/L NaHCO3，不能用于5%CO2的环境，若放入CO2培养相，溶液将迅速变酸，使用时应注意。 配制溶液应使用双蒸水或去离子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，应当首先溶解这些成分。配好的平衡盐溶液可以过滤除菌或高温灭菌。 二、消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消
区别是前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank"s常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2的培养条件，Hank"s平衡液仅含有0.35g/L NaHCO3，不能用于5%CO2的环境，若放入CO2培养相，溶液将迅速变酸，使用时应注意。 配制溶液应使用双蒸水或去离子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，应当首先溶解这些成分。配好的平衡盐溶液可以过滤除菌 或高温灭菌。 二、消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞
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