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- PEPROTECH
- ZK-0031213
- 中国/美国
- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 英文名：
Recombinant Chloride Channel Accessory 1 (CLCA1)
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海再康
- 保存条件：
-20℃
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | zk669Hu01 |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 95% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 28.7kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in PBS, pH7.4, containing 5% trehalose, 0.01% sarcosyl. |
MGHHHHHHSGSEF- NTISG CFNEVKQSGA IIHTVALGPS AAQELEELSK MTGGLQTYAS DQVQNNGLID AFGALSSGNG AVSQRSIQLE SKGLTLQNSQ WMNGTVIVDS TVGKDTLFLI TWTMQPPQIL LWDPSGQKQG GFVVDKNTKM AYLQIPGIAK VGTWKYSLQA SSQTLTLTVT SRASNATLPP ITVTSKTNKD TSKFPSPLVV YANIRQGASP ILRASVTALI ESVNGKTVTL ELLDNGAGAD ATKDDGVYSR YFTTYDTNGR
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
氯离子通道辅助蛋白1(CLCA1)重组蛋白Ready-to-use: No need to heat, dilute or add reducing agents before use.
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文献和实验X-100或脱氧胆酸钠）和低浓度变性剂（2mol/L尿素或盐酸胍等）洗涤除去脂类和膜蛋白，这一步很重要，否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解[6、7、8]。 包涵体的溶解必须用很强的变性剂，如8mol/L尿素、6~8mol/L盐酸胍，通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。其中尿素的增溶效果稍差，异氰盐酸胍最强；去污剂，如SDS[7]，可以破坏蛋白内的疏水键，可以增溶几乎所有的蛋白，但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中；酸，如70%甲酸[9]，可以破坏
。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产。与稳定基因表达相比，瞬时表达（TGE）主要适用于短期内制备重组蛋白，普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞，能够完成mL到100L的体积的蛋白表达，一般在10天内即可快速转染，无需质粒DNA的遗传性选择。 08转染效率监测 基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。 可以使用报告基因来确定优化条件，其表达蛋白易检测，在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶（CAT
沉淀保存于-20℃或-70℃冰箱中。 二、氯霉素酰基转移酶重组蛋白的分离、纯化 1. NTA层析柱的准备：在层析柱中加入1mL NTA介质，并分别用8mL 去离子水，8mL上样缓冲液洗涤。 2. 重组蛋白的变性裂解：在冰浴中冻融菌体沉淀，加入5mL上样缓冲液, 用吸管抽吸重悬，超声波破裂菌体，用振荡器等轻柔的混匀样品60min, 4℃ 12000rpm 离心 30 min, 将上清吸至一个干净的容器中，并弃沉淀。取10ul 上清样品用于SDS-PAGE 分析。 3. 上清样品以10
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