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One-Step Multiplex RT-gPCRMast

er Mix(ONE TUBE)
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  • 瀚海新酶
  • HMD3913
  • 2026年04月22日
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    产品概述

     

    One-Step Multiplex RT-qPCR Master Mix(ONE TUBE) 是 RNA 全预混 RT-qPCR 专用预混液,适用于以 RNA 为模板的单重或多重定量 PCR 检测。在反应过程中,逆转录和定量 PCR 在一管内完成,简化了实验操作。本产品支持引物探针提前预混,配置成工作液后,低温下可长期保存,后续使用时直接加入样本核酸即可。本产品使用 UDG-dUTP 防污染措施,能有效防止扩增产物气溶胶污染的风险。本产品可兼容快速程序,可缩短检测时间。

     

    产品信息

    产品名称 货号 规格
    One-Step Multiplex RT-qPCR Master Mix(ONE TUBE) HMD3913-01 100rxn
    HMD3913-02 1000rxn
    HMD3913-03 5000rxn

     

    注意事项

     

    1.在实验过程中请使用 RNase free 耗材。
    2.引物设计相关建议/要求:
    类别 建议/要求
    长度 18-30个碱基较为合适;
    GC含量 40-60%
    Tm值
     1.常规引物设计软件均可以给出Tm值(推荐

    使用Oligo 7);

     2.简单的Tm值计算公式为:Tm=4℃*(G+C)

     +2℃*(A+T);

     3.建议正向和反向引物Tm值尽量接近;

     4.建议引物设计Tm值在55-60℃内,提高退

    火温度可以增加PCR试剂的特异性。
    引物设

     1.建议PCR扩增产物长度在70-200bp之间;

     2.尽量避免在模板的二级结构区域内设计引

    物 ;

     3.避免正向和反向引物3'端形成2个或以上

    的互补碱基以减少引物二聚的形成;

     4.引物3'端不能有多于3个连续的G或者C,

    引物3'端末端碱基不能为T;

     5.引物自身不应存在互补序列,否则引物自身

    会折叠成发夹状结构;

    3. 探针设计相关建议/要求:
    类别 建议/要求
    长度 18-30个碱基较为合适
    探针设计  1.探针建议使用HPLC级别以上纯化,否则残

    留的未结合荧光染料会造成荧光本底升高从

    而降低检测的灵敏度;

     2.探针5'端应避免使用碱基G;

     3.探针建议Tm值在65-70℃;

     4.如探针中含有突变,尽量控制在两端,不要

    在探针中部存在突变。

     5.探针尽量不要存在二级结构,如必须有,须

    控制探针Loop环Tm值<40℃。
     

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