- ￥55
- MP Biomedicals
- 08W00015
- 2026年01月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Protein Loading Buffer (SDS-PAGE)-5X
- 保质期：
12个月
- 供应商：
MP Biomedicals
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
08W00015(1 mL)
5×变性非还原性蛋白上样缓冲液
Protein Loading Buffer (SDS-PAGE)-5X
产品介绍
5×变性非还原性蛋白上样缓冲液是一种改良型5×蛋白上样缓冲液，含溴酚蓝染料和SDS，但不含二硫苏糖醇（DTT）。适用于常规SDS-PAGE 电泳的蛋白样品上样。
产品信息
储存条件：- 20℃储存，有效期1 年。建议分装后冷冻储存，以避免反复冻融。
注意事项：
1. 本产品为5×浓缩液形式，需根据实验要求稀释为1×工作液后使用。
2. 仅用于科研用途，不可用于体外诊断。
3. 为保障您的安全，进行实验时请穿戴个人防护装备/衣物。
操作指南（仅供参考）
1. 将5×变性非还原性蛋白上样缓冲液与蛋白质样品按1:4 的比例混合。
2. 将样品混合物在95-100℃条件下加热3-5 min，使蛋白质完全变性。
3. 待样品混合物冷却至室温后，直接上样至SDS-PAGE 凝胶的加样孔中。
4. 当溴酚蓝迁移至凝胶底部时，即可停止电泳。
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| 货号 | 英文名 | 中文名 | 规格 |
| 08W00015 | Protein Loading Buffer (SDS-PAGE)-5X | 5×变性非还原性蛋白上样缓冲液 | 1 mL |
| 08W00016 | Protein Loading Buffer (Native-PAGE)-5X | 5×非变性还原性蛋白上样缓冲液 | 1 mL |
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文献和实验器上）2 小时。3. 4 ℃ 下在微型离心机中以 16000 × g 离心 20 分钟。轻轻地从离心机中取出离心管，置于冰上。将上清液转移至放置在冰上的新离心管中。弃去沉淀。二、样品制备1. 取出小部分 (50 μL) 裂解物，用于蛋白分析。确定每种细胞裂解物的蛋白浓度。2. 向剩余体积的细胞裂解物中加入等体积的 2× Laemmli 样品缓冲液。我们推荐采用以下方法来还原样品和使样品变性，除非在线抗体数据表指明应使用非还原和非变性条件。3. 还原和变性：在 100 ℃ 下将样品缓冲液中的每种细胞裂解物煮沸
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
加入：Labeling 5× buffer 10 μl（含有随机引物）dNTPmix 2 μl(含 dCTP、dGTP、dTTP 各 0.5 mM)BSA（小牛血清白蛋白）2 μl[ a -32 P]dATP 3μlKlenow 酶 5 U3. 将变性模板 DNA 加入到上管中，加 ddH2O 至 50 μl，混匀。室温或 37 ℃ 1 hr。4. 加 50 μl 终止缓冲液终止反应。标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于 a -32 P 的半衰期只有 14 天，所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好
