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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
储存-20℃,干燥、避光、密封
- 保质期:
2年
- 英文名:
EcoRI
- 库存:
1000
- 供应商:
四川省维克奇生物科技有限公司
- CAS号:
80498-17-5
- 规格:
5ku
中文名称:限制性内切酶EcoR I
英文名称:EcoRI
分子式:Unspecified
分子量:暂无
纯度:BR
CAS号:80498-17-5
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文献和实验消化所需的限制性内切酶的量。一般说来,线性DNA比超螺旋DNA更易消化。比如,酶切1uglambdaDNA,需要1-2单位的酶,而酶切1ug质粒DNA,需要3-5单位的酶。 6)使用限制性内切酶的一般步骤是什么? 一般步骤如下: A)测试酶切DNA的量 B)计算完全酶切所需的酶量。为使终体积中甘油的浓度低于8%,计算能加的酶量,最多能加终体积的10%(甘油的浓度为5%)。 C)10X反应液的体积应为终体积的1/10;10X反应液的体积不应小于
学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法,理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具,琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。 限制性核酸内切酶: 是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具,所以常常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等一起称为工具酶。 琼脂糖凝胶电泳: 是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场的作用下及中性pH
的反应缓冲液中,许多限制性内切酶 在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。 BSA在内切酶的缓冲液的作用 1.BSA是酶的稳定剂,防止酶的分解和非特异性吸附; 2.BSA能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的至于作用机理我不是很清楚,可能是因为它结构中有17个二硫键,和一个巯基,巯基的化学反应很活泼,二硫键有抗氧化还原的作用
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