- ￥2000 - 8000
- 湖北省武汉市
- Conus amadis Mu-onotoxin-like Am3.2 重组蛋白表达
- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
大肠杆菌系统重组蛋白表达
- 提供商：
普健生物（武汉）科技有限公司
Uniprot号：A0A3G3C7U2
基因名：
蛋白名：Mu-onotoxin-like Am3.2
蛋白别名：
Mu-onotoxin-like Am3.2
服务内容：
| 服务项目 | 客户提供 | 服务内容 | 服务周期 | 交付内容 |
|---|---|---|---|---|
| 大肠杆菌系统 蛋白表达 |
基因序列 | 方案沟通 | 1天 | 方案报告 |
| 密码子优化和基因合成 | 5天 | 基因合成报告 | ||
| 表达纯化测试 | 3天 | 表达纯化测试报告 | ||
| 1L表达及纯化 | 3天 | 蛋白样品(3-5mg)及报告 | ||
| 放大发酵及纯化 | 7天 | 纯化的蛋白及报告 |
案例展示：
A0A3G3C7U2相关研究文献：
1. Cone snail prolyl-4-hydroxylase alpha-subunit sequences derived from transcriptomic data and mass spectrometric analysis of variable proline hydroxylation in C. amadis venom.
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文献和实验表达材料： ( 1 ) LB (Luria—Bertani))培养基： 酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g NaCl 10g 琼脂 (Agar) 1-2% 蒸馏水 (Distilled water) 1000ml pH 7.0 适用范围：大肠杆菌 ( 2 ) IPTG 贮备液： 2 g IPTG溶于10 mL 蒸馏水中,0 . 22 μm 滤膜过滤除菌,分装成1 mL /份,-20 ℃ 保存
4 °C离心30 min，以分离上清和沉淀。1.5 ml 裂解缓冲液重悬沉淀。分别取10 μl上清和重悬液为样品。 7) 加入10μl谷胱甘肽琼脂糖4B 珠，4 °C孵育 1 hr并用 200 μl 1 x PBS洗3次。离心后收集上清。 8) 10 μl洗脱缓冲液(20 mM谷胱甘肽， 75 mM Tris pH 8.0, 150 mM NaCl)清洗柱子。 9) 每一步取的样品进行合适浓度的 SDS-PAGE，以确定表达纯化的条件和蛋白表达
子和重组酶。大肠杆菌β-Gal在中性pH时活性最高，然而脊椎动物的β-Gal是溶酶体酶，在pH4.5的乙酸盐缓冲液中活性最高。孵育期缓冲液不会影响到TBS-380检测4-MU荧光值的灵敏度。 5.1 根据操作指导，将裂解细胞和4-MU底物共同孵育。所有样品同一时间内孵育，通常2min。 5.2 向100 μL细胞裂解液中加入1.9mL碳酸盐终止缓冲液，终止β-Gal的活性，从而制备检测样品。
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