- 货号：6924492001
- 产品全称：FS Essential DNA Probes Master（FastStart Essential DNA 探针法预混剂）
- 规格：10×5 mL，即包含 10 支独立包装，每支容量为 5 mL，可满足一定数量的探针法定量 PCR 实验需求
- 所属品牌：ROCHE / 罗氏，依托罗氏在生命科学领域的技术积累，该产品在 PCR 试剂领域具备较高的可信度与稳定性
属于探针法定量 PCR（qPCR）专用预混剂，是罗氏 FastStart 系列试剂的重要组成部分。核心定位为 “即开即用的热启动反应混合物”，专为需要高特异性、高灵敏度的探针法核酸定量检测场景设计，适用于常规实验室的 qPCR 实验操作，不用于诊断用途。
搭载罗氏经典的FastStart Taq DNA 聚合酶，该酶通过化学修饰（在特定氨基酸残基上添加不耐热保护基）实现 “热启动” 功能：
- 室温稳定性：在室温条件下（如实验前试剂准备、机器人移液操作阶段），酶活性处于 “钝化” 状态，可避免引物非特异性结合导致的无效延伸，即使反应混合物在室温放置数小时，也能维持反应特异性。
- 高温激活：仅在 PCR 预变性步骤（通常为 + 95°C），保护基会被去除，酶活性完全恢复，确保扩增反应仅在目标温度下启动，显著降低非特异性产物（如引物二聚体）的生成，提升实验重复性。
产品体系中包含dUTP（脱氧尿苷三磷酸） ，可与尿嘧啶 - DNA 糖基化酶（Uracil-DNA Glycosylase, UDG）配合使用，形成 “残留污染清除机制”：
- PCR 扩增过程中，dUTP 会替代部分 dTTP 整合到新合成的 DNA 产物中；
- 若后续实验存在前次 PCR 产物的残留污染，加入的 UDG 可特异性识别并降解含尿嘧啶的污染 DNA，有效避免 “交叉污染导致的假阳性结果”，尤其适合多批次、高通量的 qPCR 实验场景。
- 仪器兼容性：虽未明确标注适配所有品牌 qPCR 仪，但参考罗氏 FastStart 系列同类产品（如 FastStart Universal Probe Master）的特性，推测其可适配非罗氏品牌的 qPCR 系统（如 Applied Biosystems 系列实时荧光定量 PCR 仪），无需针对特定仪器调整反应方案，仅需根据仪器要求优化反应条件即可。
- 检测方法适配：专为探针法检测设计，可与水解探针（如 TaqMan® 探针）、双杂交探针（HybProbe）等多种探针类型兼容，适用于基因表达定量、SNP 分型、突变检测等探针法 qPCR 应用场景。
依托高纯度的 FastStart Taq DNA 聚合酶及优化的反应缓冲体系，该预混剂可高效扩增目标核酸片段，即使模板浓度较低（如低丰度 cDNA、微量基因组 DNA），也能实现灵敏检测，且相较于普通 PCR 试剂，更容易获得较低的循环阈值（Ct 值），提升低丰度靶标的检出率。
可扩增长度高达 500 bp 的核酸片段，且对富含 GC 或 AT 的高难度模板（如 GC 含量＞60% 或 AT 含量＞70% 的基因片段）具有良好的扩增能力，无需额外添加特殊助扩增试剂（如 DMSO、甜菜碱），简化实验操作流程。
扩增产物可通过琼脂糖凝胶电泳进行可视化验证，便于确认扩增产物的大小与纯度，排除非特异性扩增干扰，为 qPCR 结果的可靠性提供双重保障。
- 常规实验室的探针法 qPCR 实验，包括基因表达定量、病原体核酸检测（科研用途）、SNP 位点检测等；
- 可与罗氏 Transcriptor First Strand cDNA 合成试剂盒配合使用，用于两步法 RT-qPCR 实验（先将 RNA 逆转录为 cDNA，再以 cDNA 为模板进行探针法 qPCR），适用于基因表达的转录组水平定量研究。
- 储存条件：需按照试剂说明书要求储存（通常为 - 20°C 避光保存），避免反复冻融，建议分装后使用，以维持试剂活性；
- 反应体系配置：作为 2× 浓度的预混剂，使用时需按照 “预混剂：模板：引物 / 探针：无酶水 = 1:X:Y:Z” 的比例配置反应体系（具体比例需参考实验方案或试剂说明书），确保各组分浓度准确；
- UDG 使用：若需启用防污染功能，需在 PCR 反应前加入适量 UDG，并在预变性步骤前增加 “UDG 酶促反应步骤”（通常为 37°C 孵育 5-10 分钟），具体操作需参考 UDG 试剂说明书。
每批次产品均经过严格的功能测试，通常会使用三种代表性模板（富含 GC 的模板、富含 AT 的模板、440 bp 左右的长片段模板）进行 qPCR 性能验证，确保批次间的稳定性与一致性，实验人员可放心使用。
与罗氏另一款探针法预混剂（货号 6402682001，规格 5×100 反应）相比，6924492001 以 “10×5 mL” 的液体包装形式为主，更适合大样本量、高通量的实验需求（单次可配置更多反应体系）；而 6402682001 为 “按反应次数包装”，更适合小批次、低通量的实验场景，两者核心技术与性能一致，仅规格与包装形式不同，实验人员可根据实验规模选择适配产品。
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