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50L
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文献和实验相关专题 DMEM是现今细胞培养 中比较常见的培养基之一,DMEM培养基是建立在MEM培养基的基础上研究出来的,它与MEM培养基相比较,DMEM培养基中加大了MEM培养基中各种成分的用量,下文主要介绍一下自己配制DMEM的方法。 一、这里是一份GIBCO的低糖DMEM 粉剂配制说明(普通高糖的DMEM培养基配法是一样的): TO PREPARE 1*LIQUID 1. Measrue
细胞培养基成分复杂,包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异,这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖,有时也会使用半乳糖代替,这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸(尤其是 L - 谷氨酰胺)和丙酮酸盐也可作为碳源。除了营养成分,培养基也会帮助维持培养体系的 pH 和渗透压。pH 的维持依靠一种或多种缓冲液体系,最常见的包括 CO2/NaHCO3、磷酸盐和 HEPES 等,血清也可以作为完全培养基的缓冲液(文章末尾会送
苄青霉素及 140 g/mL X-gal。作为载体的质粒都含有一种或两种抗生素的耐药基因,当把这种质粒转入大肠杆菌后,此菌便获得了抵抗这种抗生素的能力。目前分子克隆所用的克隆载体多含氨苄青霉素耐药基因,所以涉及最多的是氨苄青霉素筛选。当将氨苄青霉素加入培养基中后,只有含质粒的细菌能够繁殖,而不含质粒的细菌则不能繁殖形成菌落。此种筛选不能鉴别重组质粒或自身环化的质粒。在用含氨苄青霉素耐药基因的质粒进行克隆时,转化平板培养基中要加入氨苄青霉素。(四)质粒和菌株的保存:1. 质粒可以在-20 ℃ 冰冻保存。2. 菌株
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