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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1300.0 |
英文名称:Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily C, Member 6
简称:TRPC6
单位:ng/mL
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月。
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中转化受体电位阳离子通道亚家族C成员6含量。
实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被转化受体电位阳离子通道亚家族C成员6(TRPC6)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化受体电位阳离子通道亚家族C成员6(TRPC6)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成:30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样,待测样品孔中先加样品稀释液 ,然后再加待测样品(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。
10.终止:每孔加终止液,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照产品手册操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验)可提高敏感性。最后,通过确定由多个操作人员和/或使用不同抗体批次进行的研究是否提供可比较的结果来确定可重复性[1]。 2. 多重荧光免疫组化检测方法的开发和优化 a 首先使用单标免疫组化和免疫荧光优化 首先开发单标测定,以初步了解染色参数,包括组织处理/固定参数、抗原检索条件( pH 值和温度)、基于已知阳性对照的亚细胞定位和染色模式、抗体和检测试剂滴定以及其他孵育和封闭条件。单标免疫组化是此步骤的首选起始方法,除非用户以前具有免疫荧光(IF)的经验[2]。 建立 IHC
细胞术已经成为凋亡分析的重要检测手段。PharMingen公司提供了许多从多种角度研究凋亡的试剂系统,包括小鼠、大鼠和人类蛋白抗体:Fas和Fas配体、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信号蛋白;再有,提供了多种流式细胞仪检测试剂盒,包括:Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit;另外,还提供了mRNA分析试剂——RiboQuant Rnase
1 : 在细菌中通过“空白”区域将自我互补的区域隔开,获得稳定的反向重复序列。如果间隔序列编码内含子,基因沉默效率会非常高,确保由目的基因构建的转化子可以 100% 地引起不同程度的基因沉默[12]。 注 2 : BSMV 是大麦病毒家族的典型成员,它是正义单链 RNA 病毒,由 α、β 和 γRNA 组成三元基因组。选择植物中需要被沉默的目的基因的转录序列片段插入到 DNA 质粒中,可以通过体外转录合成 γRNA。植物 cDNA片段被克隆到 γb 可读框终止子的下游(图 12.2)。 注
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