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pCaEXP-GPR1(C. albicans)质粒载体

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  • ¥680 - 1280
  • KEMOBio
  • 进口/国产
  • KM1060198
  • 2025年10月31日
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    • 英文名

      pCaEXP-GPR1(C. albicans)

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      100

    • 供应商

      科淼生物

    • 规格

      0.5ug/0.5ug

    规格:0.5ug产品价格:¥680.0
    规格:0.5ug产品价格:¥1280.0
    产品名称:pCaEXP-GPR1(C. albicans)质粒载体
    英文名称:pCaEXP-GPR1(C. albicans)
    货号:KM1060198
    图谱:微客服
    宿主:丝状真菌
    用途:蛋白表达
    片段类型:ORF
    片段物种:人白色念珠菌
    原核抗性:Amp
    真核抗性:
    荧光标记:

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    相关实验
    • 质粒载体的粘端DNA连接

      (1)用适当的限制酶消化质粒和外源DNA。如有必要,可用凝胶电泳分离片段并(或)用碱性磷酸酶处理质粒DNA。通过酚:氯仿抽提和乙沉淀来纯化DNA,然后用TE(pH7.6)溶液使其浓度为100/ml。 (2)按如下所述设立连接反应混合物: a.将0.1μl载体DNA转移到无菌微量离心管中,加等摩尔量的外源DNA。 b.加水至7.5μl,于45℃加温5分钟以使重新退炎的粘端解链,将混合物冷却到0℃。 c.加入:10xT4噬菌体DNA连接酶缓冲液 1μl T4噬菌体NDA

    • 质粒载体连接反应

            连接反应 (一)外源DNA和质粒载体的连接反应   外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口,当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接

    • 质粒载体中进行平末端片段的克隆

      片段2 [60fmol (~10ng)]C和F载体1 (60fmol)和外源插入片段3 (60fmol)D线状载体(5’-磷酸化)(60fmol)G环状载体[60fmol (~10ng)]1 载体DNA 已进行去磷酸化2 外源目的DNA 可以连接接头。3 连接反应中,质粒载体和插入的DNA 片段摩尔比一般为1:1。DNA 的总浓度应约为10ng/μl。(1)A、B和C管中加入:10×连接缓冲液 1.0μlT4噬菌体连接酶 0.5 Weiss单位5 mmol/L ATP

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